| pEGFP-SPAST真核表达载体的构建及遗传性痉挛性截瘫的发病机制研究 |
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| 引用本文： | 严雅萍,浦佳丽,张宝荣,赵国华.pEGFP-SPAST真核表达载体的构建及遗传性痉挛性截瘫的发病机制研究[J].中华医学遗传学杂志,2013,30(1):9-12. |
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| 作者姓名： | 严雅萍 浦佳丽 张宝荣 赵国华 |
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| 作者单位： | 浙江大学医学院附属第二医院神经内科,杭州,310009 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(项目编号：81000484),教育部博士点新教师基金(项目编号：20070335049),浙江省卫生厅青年人才基金(项目编号：2008QN017)the,National,Natural,Science,Foundation,of,China(项目编号：Proj.81000484)the,New,Doctorate,Teacher,Fund,from,Ministry,of,Education(项目编号：Proj.20070335049)the,Excellent,Young,Doctor,Fund,of,Zhejiang,Health,Department(项目编号：2008QN017) |
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| 摘 要： | 目的 构建野生型和突变型SPAST真核表达载体,研究SPAST基因突变所致遗传性痉挛性截瘫的发病机制.方法 建立野生型pEGFP-SPAST基因表达载体,采用overlap PCR方法构建突变型pEGFP-SPAST真核表达载体.细胞转染野生型和突变型pEGFP SPAST真核表达载体,观察野生型和突变型spastin蛋白在COS-7细胞中的表达,采用免疫荧光染色技术观察spastin蛋白与微管、线粒体的定位关系.结果 野生型和突变型spastin蛋白均在细胞质中表达.免疫荧光检测发现野生型和突变型spastin蛋白均不与微管共定位,也均不与线粒体共定位.结论 成功构建了野生型和突变型pEGFP-SPAST真核表达载体.突变型spastin蛋白不改变其细胞质定位.功能研究提示spastin蛋白可能不直接调控微管功能和线粒体功能.
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| 关 键 词： | 遗传性痉挛性截瘫 SPAST基因 真核表达载体 细胞质 微管 线粒体 |
Construction of wild-type and mutant SPAST vectors for the study of molecular mechanism of hereditary spastic paraplegia |
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| YAN Ya-ping
,
PU Jia-li
,
ZHANG Bao-rong
,
ZHAO Guo-hua.Construction of wild-type and mutant SPAST vectors for the study of molecular mechanism of hereditary spastic paraplegia[J].Chinese Journal of Medical Genetics,2013,30(1):9-12. |
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| Authors: | YAN Ya-ping PU Jia-li ZHANG Bao-rong ZHAO Guo-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hereditary spastic paraplegia SPAST gene Eukaryotic expression vector Cytoplasm Microtubule Mitochondria |
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