| 人Slit2全长cDNA的真核表达及鉴定 |
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| 引用本文： | 蒋羽清,刘锦波,赵俊丽,张伟锋,夏海滨. 人Slit2全长cDNA的真核表达及鉴定[J]. 南京医科大学学报(自然科学版), 2010, 30(2): 183-187 |
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| 作者姓名： | 蒋羽清 刘锦波 赵俊丽 张伟锋 夏海滨 |
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| 作者单位： | 南京医科大学附属常州二院中心实验室,常州二院骨科,江苏,常州,213003;陕西师范大学生命科学院基因治疗研究室,陕西,西安,710062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30571873) |
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| 摘 要： | 目的:对人神经轴突导向因子Slit2(hSlit2)全长cDNA进行真核表达并进行鉴定。方法:采用分段克隆的方法获得hSlit2全长cDNA的克隆,并构建hSlit2全长cDNA真核表达重组质粒pCMV-GFP-C/hSlit2,用磷酸钙共沉淀法将其转染到人胚肾细胞HEK-293细胞中,通过免疫印迹法鉴定其蛋白表达。结果:经酶切鉴定证实hSlit2全长cDNA的真核表达载体构建成功,免疫荧光蛋白和Western blot结果证实hSlit2全长cDNA在HEK-293细胞中的表达。结论:人神经轴突导向因子hSlit2真核表达载体构建成功,为进一步完善hSlit2蛋白及各水解片段功能研究提供了实验基础。
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| 关 键 词： | 轴突导向因子 hSlit2 全长cDNA 真核表达 |
Eukaryotic expression and identification of human Slit2 gene in HEK-293 cell line |
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| JIANG Yu-qing,LIU Jin-bo,ZHAO Jun-li,ZHANG Wei-feng and XIA Hai-bin. Eukaryotic expression and identification of human Slit2 gene in HEK-293 cell line[J]. Acta Universitatis Medicinalis Nanjing, 2010, 30(2): 183-187 |
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| Authors: | JIANG Yu-qing LIU Jin-bo ZHAO Jun-li ZHANG Wei-feng XIA Hai-bin |
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| Affiliation: | JIANG Yu-qing,LIU Jin-bo*,ZHAO Jun-li1,ZHANG Wei-feng1,XIA Hai-bin1 |
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| Abstract: | Objective:To construct the recombinant eukaryotic expression vector for human Slit2 full-length cDNA and express it in human embryonic kidney cells (HEK-293 cell line). Methods:The full length cDNA of hSlit2 was obtained and cloned into eukaryotic expression vector pCMV-GFP-C to construct the recombinant eukaryotic expression vector pCMV-GFP-C/hSlit2,and the recombinant plasmid was transfected into 293 cells by calcium phosphate coprecipitation. The expression of hSlit2 protein was analyzed by Western blot.... |
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| Keywords: | axon guidance hSlit2 full-length cDNA eukaryotic expression |
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