血液实验教学中血浆制备的条件优化及储存时间对实验效果的影响

目的：对生理学血液实验教学中富血小板血浆（platelet-richplasma，PRP）及少血小板血浆（platelet-poorplasma，PPP）制备条件进行优化，并明确血浆储存时间对实验效果的影响。方法：比较家兔麻醉状态下不同采血方法、家兔有无麻醉、采血后血液置于不同材质的试管以及不同离心参数等因素对PRP及PPP凝血时间以及得率的影响；并且测定储存时间对制备的血浆凝固时间的影响。结果：（1）家兔麻醉状态下，三种采血法（头皮针颈动脉采血、颈动脉放血、心脏采血）无明显差异；（2）采用心脏采血方法，在家兔清醒状态下采血所得PRP凝固时间比麻醉状态下的时间更短（P﹤0.001）；（3）玻璃离心管作为容器所得PRP和PPP的凝固时间分别较塑料离心管的短（P﹤0.001），且塑料离心管所得PPP得率高于玻璃采血管（P﹤0.01）；（4）三种离心参数制备PRP，以Aghaloo法PRP的凝固时间最长（P﹤0.001），本科室传统离心法与Landesberg法的凝固时间无统计学差异；Land-esberg法和Aghaloo法的PRP得率无差异，但较本科室传统离心法高（P﹤0.001）；（5）PRP和PPP于-20℃储存1-360d后，对血浆凝固时间无明显影响。结论：PRP的制备以家兔在清醒状态下、心脏采血、采用玻璃离心管、以Landesberg法离心，血浆得率高、凝固时间短；PPP的制备采用塑料离心管，以1500×g离心30min，血浆得率高、凝固时间长。将所得血浆分装，-20℃保存，血小板活性可保持一年。