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| 用单克隆抗体筛选小细胞肺癌相关抗原基因 | |
| 作者姓名： | 李斯德 曹晓波 王斌 张倩 莫忠根 |
| 作者单位： | 上海市肿瘤研究所免疫及细胞生物学研究室 |
| 摘 要： | 用分子生物学技术克隆肿瘤相关抗原基因对认识肿瘤抗原本质、深入研究肿瘤抗原的结构和功能、研究肿瘤多肽疫苗有重要意义。我们已获得一组抗人小细胞肺癌单克隆抗体,并在体外证实该抗体所识别的抗原在靶细胞有较好的特异性和较高分布密度,是多肽性抗原决定簇。在此基础上,以抗体为探针,筛选小细胞肺癌基因库,目的在于寻找编码抗体所识别抗原的肿瘤相关基因。 λgt_(11)噬菌体为载体构建的人小细胞肺癌细胞株NCI—H_(128)cDNA文库的效价约1.3×10~6,可在大肠杆菌系统和β-半乳糖苷酶构成融合蛋白的形式,表达插入的外源蛋白。我们用抗NCI-H_(128)单抗2F_7和E_6混合作为控针。碘_(125)用Iodogen方法标记在纯化的抗小鼠抗体上。10~7的菌斑转移到NC膜,经放射自显影,从中筛选到5个阳性菌斑,经4轮克隆化后,阳性斑达100％,对其中N0.4克隆进一步研究。该克隆的溶源菌经 |
| 关 键 词： | 小细胞肺癌； 抗原基因； 单克隆抗体； 肿瘤抗原； 菌斑； 鼠抗体； 抗原决定簇； 溶源菌； 肿瘤多肽疫苗； 基因对 |
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