| 携带可调控人胰岛素基因的腺病毒载体的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 徐美东,张轶群,沈坤堂,姚礼庆,秦新裕. 携带可调控人胰岛素基因的腺病毒载体的构建和鉴定[J]. 中国临床医学, 2006, 13(2): 246-248 |
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| 作者姓名： | 徐美东 张轶群 沈坤堂 姚礼庆 秦新裕 |
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| 作者单位： | 复旦大学附属中山医院普外科,上海,200032 |
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| 摘 要： | 目的:构建携带葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)启动子控制下的人胰岛素基因的腺病毒载体。方法:将GIP- hIns基因自pCDNA3-GIP-hIns质粒中酶切下来,克隆至切除CMV启动子的pCA13-△CMV质粒中,形成转移质粒 pCA13-GIP-hIns,然后与质粒pBHGE3共转染至293细胞株,在其中同源重组形成腺病毒颗粒。采用PCR方法对重组体进行鉴定,同时测定病毒滴度。体外转染STC-1细胞,并采用RT-PCR检测感染腺病毒的细胞内有无hIns mRNA 的转录。结果:由pCA13-GIP-hIns和pBHGD共转染至293细胞后,可得到阳性重组体Ad.GIP-hIns,经PCR检测表明已含有GIP-hIns基因。纯化所得腺病毒滴度约为1×1011 pfu／ml。RT—PCR证实在感染重组体腺病毒Ad．GIP— hIns的细胞中有相应mRNA的转录。结论:成功构建了携带GIP启动子控制下的人胰岛素基因的腺病毒载体,为进一步胰岛素基因治疗糖尿病的实验研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 腺病毒载体 葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP) 人胰岛素基因 |
Construction and Identification of Recombinant Adenovirus Harboring the GIP-Human Insulin Gene |
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| XU Meidong ZHANG Yiqun SHEN Kuntang,et al. Construction and Identification of Recombinant Adenovirus Harboring the GIP-Human Insulin Gene[J]. Chinese Journal Of Clinical Medicine, 2006, 13(2): 246-248 |
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| Authors: | XU Meidong ZHANG Yiqun SHEN Kuntang et al |
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| Affiliation: | XU Meidong ZHANG Yiqun SHEN Kuntang,et al Department of General Surgery,Zhongshan Hospital,Fudan University,Shanghai 200032 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Adenovirus vector Glucose-dependent insulinotropic polypeptide(GIP) Human insulin gene |
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