重组囊尾蚴核糖体P蛋白的基因表达及纯化研究 |
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引用本文: | 杨晓莉,王海燕,郝钦芳,焦小杰,张丽萍.重组囊尾蚴核糖体P蛋白的基因表达及纯化研究[J].中国医学检验杂志,2004,5(1):37-39. |
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作者姓名: | 杨晓莉 王海燕 郝钦芳 焦小杰 张丽萍 |
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摘 要: | 目的]以高效表达菌株BL21(λDE3)为材料,研究重组囊尾蚴核塘体P蛋白的分离纯化。方法]采用基因克隆的方法已获得带有囊尾蚴核塘体P蛋白基因的重组质粒pUC18-P,将P蛋白基因从pUC18-P切下来重新克隆到高效表达质粒pGEX-2T中,得到新的重组质粒pGEX-2T—P,将重组质粒pGEX-2T—P转化到BL21(λDE3)中进行诱导表达,通过对培养温度,诱导剂IFTG的浓度以及诱导时间的优化,实现了囊尾蚴核塘体P蛋白基因的高效表达,表达目的产物占细菌总蛋白的20%左右。再经亲和层析和凝胶过滤纯化,获得了囊尾蚴核塘体P蛋白纯品。结果]获得了纯化的囊尾蚴核糖体P蛋白结论]为临床检测囊尾蚴提供了新的材料与方法。
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关 键 词: | 囊尾蚴 蛋白 重组质粒 核糖体 纯化 UC 基因表达 高效表达 诱导表达 亲和层析 |
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