Sox2下调表达对MDA-MB-231乳腺癌细胞β-catenin与转录中介因子γ的影响 |
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引用本文: | 李雄武,张徽,柳满然.Sox2下调表达对MDA-MB-231乳腺癌细胞β-catenin与转录中介因子γ的影响[J].第三军医大学学报,2016(1):55-61. |
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作者姓名: | 李雄武 张徽 柳满然 |
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作者单位: | 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心病理学教研室,重庆,400016 |
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摘 要: | 目的 下调乳腺癌MDA-MB-231细胞Sox2基因表达,观察对细胞增殖、侵袭和凋亡的影响以及信号因子β-catenin和TIF1γ表达的影响.方法 将MDA-MB-231细胞分为重组质粒转染组(转染Sox2-shRNA干扰载体)、阴性对照组(转染pMafic7.1-shRNA-NC质粒)、空白对照组(未经处理的MDA-MB-231细胞,n=6),并将shRNA-Sox2-1瞬时转入乳腺癌MDA-MB-231细胞,通过Western blot检测乳腺癌MDA-MB-231细胞中Sox2蛋白表达水平,FCM检测细胞凋亡的情况,Transwell检测细胞的侵袭能力,MTS检测细胞活力和增殖能力.另外,采用Westem blot和免疫组化检测靶向抑制Sox2对信号因子β-catenin和TIF1γ蛋白的表达与分布.结果 成功构建重组载体pMafic7.1-shRNA-Sox2.与空白对照组(未转染组)和阴性对照组(转染pMafic7.1-shRNA-NC)相比,pMafic7.1-shRNA-Sox2转染至MDA-MB-231细胞后,Sox2蛋白的表达水平明显下调(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.05),细胞的侵袭能力、活力和增殖能力均明显下降(P<0.05).与空白对照组(0.79 ±0.07)和阴性对照组(0.74±0.10)相比,重组质粒转染组β-catenin(0.15±0.04)蛋白的表达水平明显下调(P<0.05);同样,与空白对照组(0.74±0.05)和阴性对照组(0.64±0.07)相比,重组质粒转染组TIF1γ蛋白(0.11±0.01)的表达水平明显下调(P<0.05).结论 靶向沉默Sox2基因能促进细胞凋亡,抑制细胞的增殖和侵袭,其作用可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路与TIF1γ调控有关.
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关 键 词: | 乳腺癌 RNA干扰 凋亡 侵袭 Sox2 β-catenin TIF1γ |
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