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5株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7全长基因的克隆及序列分析
引用本文:贾怀杰,景志忠,房永祥,王晓霞,陈国华,李克斌,窦永喜,瞿惠玲,杨孝朴. 5株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7全长基因的克隆及序列分析[J]. 中国病原生物学杂志, 2009, 0(8)
作者姓名:贾怀杰  景志忠  房永祥  王晓霞  陈国华  李克斌  窦永喜  瞿惠玲  杨孝朴
作者单位:甘肃农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所;家畜疫病病原生物学国家重点实验室;农业部兽医公共卫生重点实验室;甘肃省兽医局;
基金项目:国家自然科学基金项目(No.30871884); 国家支撑计划项目(No.2006BAD31B03); 甘肃省支撑计划项目(No.0804NKCA076)
摘    要:目的通过测定5株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因序列,结合GenBank登录的国内外PRRSV分离株核苷酸序列,分析PRRSV核衣壳蛋白(N蛋白)的遗传变异情况。方法根据GenBank公布的PRRSV ATCCVR-2332株全基因组核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增出3株PRRSV甘肃流行株(命名为GSZY、GSBY、GSZY株)、1株陕西流行株(命名为Shanxi株)和1株PRRSV江西分离株(命名为Jingxi株)的ORF7全长基因,克隆到pGEM-T Easy载体,然后分别测定插入的核苷酸序列。应用DNAStar序列分析软件对所测ORF7基因核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与不同来源的13个PRRSV毒株进行同源性比较。结果5株PRRSV ORF7基因与以ATCC VR-2332为代表的早期引发PRRS的美洲型毒株的核苷酸序列间的同源性为91.9%~94.3%,与国内其他PRRSV分离株的同源性为98.7%~99.7%,与欧洲型代表株LV的同源性为57.7%~58.2%。结论美洲型PRRSV N蛋白氨基酸发生了变异,但国内毒株相对保守。

关 键 词:PRRSV  地方毒株  ORF7  基因克隆  变异分析  

Cloning and phylogenetic analysis of the ORF7 full length gene of four strains of Porcine reproductive and respiration syndrome
JIA Huai-jie,,JING Zhi-zhong,FANG Yong-xiang,WANG Xiao-xia,CHEN Guo-hua,LI Ke-bin,DOU Yong-xi,QU Hui-ling,,YANG Xiao-pu. Cloning and phylogenetic analysis of the ORF7 full length gene of four strains of Porcine reproductive and respiration syndrome[J]. Journal of Pathogen Biology, 2009, 0(8)
Authors:JIA Huai-jie    JING Zhi-zhong  FANG Yong-xiang  WANG Xiao-xia  CHEN Guo-hua  LI Ke-bin  DOU Yong-xi  QU Hui-ling    YANG Xiao-pu
Affiliation:JIA Huai-jie1,2,JING Zhi-zhong1,FANG Yong-xiang2,WANG Xiao-xia2,CHEN Guo-hua2,LI Ke-bin1,DOU Yong-xi2,QU Hui-ling1,3,YANG Xiao-pu1(1.Veterinary College of Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China,2.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology,Lanzhou Veterinary Research Institute,CAAS,Key Laboratory of Veterinary Public Health of Ministry of Agriculture,Lanzhou 730046,3.Veterinary Bureau of Gansu Province,Lanzhou 730030,China)
Abstract:Objective The objective of this study was to analyze the genetic variation of the nucleocapsid protein(N protein) in Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus(PRRSV) in China by cloning and sequencing the ORF7 gene of 5 PPRSV strains and comparing it to other PRRSV epidemic strains in GenBank.Methods One pair of primers was designed according to the published full genome sequence of the ATCC VR-2332 strain in GenBank;the ORF7 full length gene of three Gansu epidemic strains(named GSZY,GSBY,and GSL...
Keywords:PRRSV  epidemic strain  ORF7  gene cloning  variation analysis  
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