诱导型巨噬细胞特异性敲除GRK2基因小鼠模型的构建及应用 |
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引用本文: | 魏琦,朱学敏,刘潇一,杨雪枝,魏伟.诱导型巨噬细胞特异性敲除GRK2基因小鼠模型的构建及应用[J].安徽医科大学学报,2023(4):534-540. |
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作者姓名: | 魏琦 朱学敏 刘潇一 杨雪枝 魏伟 |
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作者单位: | 安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室安徽省抗炎免疫药物协同创新中心 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(编号:81973332、82003763); |
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摘 要: | 目的 建立诱导型巨噬细胞特异性敲除G蛋白偶联受体激酶2(GRK2)基因(GRK2flox/floxLyz2-CreERT+)小鼠模型。方法 基于Cre/LoxP系统构建GRK2flox/floxLyz2-CreERT+小鼠。通过PCR扩增程序及琼脂糖凝胶电泳鉴定GRK2flox/floxLyz2-CreERT+小鼠的基因型。二氧化碳法处死小鼠后,Western blot检测骨髓源巨噬细胞(BMDMs)和腹腔巨噬细胞(PMs)中GRK2表达。免疫荧光检测小鼠脑、心脏和脾脏巨噬细胞中GRK2表达。流式细胞术分析前列腺素E2(PGE2)诱导的PMs中M1/M2比例。结果 基因型鉴定结果表明,flox扩增产物长度在355 bp处有一条条带且Cre扩增产物长度在355 bp处有一条条带的小鼠即为GRK2flox/floxLyz2-CreERT+小鼠。Western blot结果显示,与GRK2flox/flox<...
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关 键 词: | G蛋白偶联受体激酶2 Cre/LoxP系统 特异性敲除小鼠 巨噬细胞 基因型鉴定 |
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