Pirfenidone通过癌相关成纤维细胞抑制胆道肿瘤侵袭 |
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引用本文: | 魏亦成,王紫怡,李炜,殷佩浩.Pirfenidone通过癌相关成纤维细胞抑制胆道肿瘤侵袭[J].安徽医科大学学报,2023(6):975-981+988. |
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作者姓名: | 魏亦成 王紫怡 李炜 殷佩浩 |
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作者单位: | 1. 安徽医科大学上海普陀中心临床学院;2. 安徽医科大学第五临床医学院;3. 上海中医药大学中西医结合肿瘤介入研究所;4. 华东理工大学药学院;5. 上海中医药大学附属普陀医院普外科 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(编号:81873137); |
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摘 要: | 目的 探究吡非尼酮(PFD)通过癌相关成纤维细胞(CAF)抑制胆道肿瘤侵袭的相关机制。方法 从胆道肿瘤患者的肿瘤组织中提取原代CAF,运用Western blot方法检测CAF的标志蛋白:波形蛋白(VIM),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),成纤维细胞激活蛋白(FAP)。鬼笔环肽实验显示成纤维细胞骨架功能。ELISA和Western blot实验验证正常成纤维细胞(NF)与CAF的TGF-β表达差异。通过CAF中加入PFD观察CAF的功能变化。ELISA,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot实验验证CAF的TGF-β表达变化。通过皮下瘤小鼠模型验证血清中TGF-β的变化。胶原收缩实验观察CAF胶原收缩功能的改变。明胶酶谱实验观察CAF的培养基中的MMP2、MMP9的变化。Western blot方法检测CAF中SMAD信号通路蛋白变化。结果 CAF的相关标志蛋白VIM,α-SMA,FAP均高表达,且CAF的丝状肌动蛋白(F-actin)表达丰富。ELISA实验显示CAF的TGF-β表达增强。Western blot实验验证CAF的胶原功能更强。Western ...
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关 键 词: | Pirfenidone 癌相关成纤维细胞 TGF-β/SMAD通路 胆囊癌 胆管癌 胶原收缩 侵袭 |
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