miR-485-5p靶向Toll样受体4调控巨噬细胞的炎症反应 |
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引用本文: | 郑锡铭,徐雪勤,张爱荣,陈仪,赵小燕,杨喜永.miR-485-5p靶向Toll样受体4调控巨噬细胞的炎症反应[J].中国卫生检验杂志,2023(9):1041-1045. |
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作者姓名: | 郑锡铭 徐雪勤 张爱荣 陈仪 赵小燕 杨喜永 |
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作者单位: | 驻马店市中心医院医学检验科 |
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摘 要: | 目的 探究miR-485-5p对Toll样受体4(TLR-4)的靶向作用,研究其在巨噬细胞炎症反应中的调控作用。方法 合成miR-485-5p模拟物(mimics)及其抑制剂(inhibitors),分别转染HEK-293T细胞,RT-PCR检测miR-485-5p的表达水平。根据miRNA靶向作用预测数据分析选定TLR-4作为研究的靶基因,构建TLR-43’UTR及其突变体萤火虫-海肾双荧光素酶报告基因系统,通过检测在细胞模型中过表达/抑制表达miR-485-5p后对荧光素酶活力的影响,验证miR-485-5p与TLR-4之间的靶向关系,Western blot检测TLR-4蛋白质表达水平。构建巨噬细胞模型,将miR-485-5p mimics及inhibitors分别转染巨噬细胞,RT-PCR检测靶基因TLR-4 mRNA的表达水平,ELISA检测上清中下游致病因子IL-6、 IL-17、IL-18的表达。结果 与对照组比较,转染miR-485-5p mimics后miR-485-5p表达水平升高,转染miR-485-5p inhibitors后miR-485-5p表达水平降低(P...
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关 键 词: | miR-485-5p Toll样受体4 THP-1细胞 |
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