流式细胞仪进行干细胞绝对计数的方法

干细胞移植对于白血病等多种疾病的治疗具有重要意义，而准确的干细胞绝对计数对于干细胞移植的成败又十分重要。流式细胞仪结合荧光单抗技术为干细胞绝对计数提供了一种快速、定量、重复性好的方法。本文介绍利用流式细胞仪进行干细胞绝对计数的原理、方法及意义。 　　1　流式细胞仪简介 　　流式细胞仪是对悬浮状态的细胞逐个计数并记录其有关参数的细胞分析仪器，因其测量速度快，在很短时间内可以分析大量细胞，并能测出多个参数，在临床上有广泛的应用。流式细胞仪能测量细胞的五个参数：前向角散射光(FSC)、侧向角散射光(SSC)、绿色荧光(FL-1)、黄色荧光(FL-2)和红色荧光(FL-3)。FSC和SSC是细胞对激发光的散射信号，分别反映了细胞的大小和细胞的粒度：细胞越大，胞内颗粒越多，则FSC和SSC越强。例如在外周血中，根据细胞大小及胞内所含颗粒性物质的多少，可区分出淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。粒细胞有较大的核或较多的颗粒，细胞直径也比淋巴细胞大，因而其FSC和SSC均比淋巴细胞强。