摘 要: | 目的探讨别欧前胡素诱导急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的机制。方法对数生长期HL-60细胞随机分为对照组(普通培养液)、10mg/L别欧前胡素组(10mg/L别欧前胡素+培养液)、30mg/L别欧前胡素组(30mg/L别欧前胡素+培养液)、50mg/L别欧前胡素组(50mg/L别欧前胡素+培养液),培养48h时行锥虫蓝染色检测4组HL-60细胞增殖抑制率,应用流式细胞仪检测细胞周期,采用实时荧光定量PCR法检测B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)mRNA相对表达量,采用Western blot法检测Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-8蛋白相对表达量。结果培养48h,对照组及10、30、50mg/L别欧前胡素组细胞增殖抑制率(1.53±0.18)%、(15.20±0.10)%、(32.80±0.10)%、(72.20±0.06)%]逐渐增加(P0.05);对照组及10、30、50mg/L别欧前胡素组G1期细胞比率(40.26±3.80)%、(41.91±5.60)%、(48.79±9.70)%、(60.42±6.30)%]逐渐增加(P0.05),S期细胞比率(34.38±7.20)%、(33.89±8.60)%、(27.86±5.30)%、(23.42±6.70)%]、G2/M期细胞比率(21.36±7.80)%、(20.23±5.80)%、(19.35±6.90)%、(16.16±9.80)%]逐渐降低(P0.05);对照组及10、30、50mg/L别欧前胡素组Bcl-2mRNA相对表达量(1.00±0.06、0.82±0.03、0.53±0.02、0.24±0.01)、Bcl-2蛋白相对表达量(1.13±0.04、1.09±0.10、0.85±0.04、0.55±0.10)逐渐降低(P0.05),Bax mRNA相对表达量(1.00±0.08、1.20±0.07、1.45±0.03、1.64±0.04)、Bax蛋白相对表达量(0.88±0.11、1.07±0.06、1.11±0.02、1.29±0.04)、cleaved-caspase-8蛋白相对表达量(1.23±0.05、1.32±0.04、1.56±0.06、1.93±0.06)逐渐增加(P0.05)。结论别欧前胡素可抑制急性髓系白血病HL-60细胞增殖,阻滞细胞于G1期,通过外源性和内源性途径诱导HL-60细胞凋亡,且呈剂量依赖性。
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