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构建中国汉族人亚健康状态肾阴虚证的DNA消减文库
引用本文:代方国,赵晓山,罗仁,张曦倩,罗云坚,崔丽娟,付婷婷. 构建中国汉族人亚健康状态肾阴虚证的DNA消减文库[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2005, 9(19): 97-99
作者姓名:代方国  赵晓山  罗仁  张曦倩  罗云坚  崔丽娟  付婷婷
作者单位:1. 南方医科大学南方医院中医科,广东省,广州市,510515
2. 广州中医药大学附属广东省中医院内二科,广东省,广州市,5105153
3. 南方医科大学南方医院生殖中心,广东省,广州市,510515
基金项目:国家自然科学基金资助(30278261,30472118),广东省科技计划资助(2003B31712,2004A30103010)~~
摘    要:目的:采用抑制性消减杂交技术构建汉族人亚健康状态肾阴虚证DNA消减文库。方法:实验于2004-02在南方医科大学南方医院糖尿病分子实验室完成。样本来源于南方医科大学南方医院汉族亚健康且中医辨证为肾阴虚证的患者1例及健康自愿者1名作为其对照组。用硅胶法抽提血白细胞DNA,用RsaI酶切基因组DNA成大小不等的片段,分别与两种不同的接头连接,进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应,将聚合酶链反应产物与U载体连接,经蓝白斑筛选后,再用聚合酶链反应方法插入片段筛选出阳性重组质粒,构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库。结果:用抑制性消减杂交方法筛选出了亚健康肾阴虚证的差异DNA片段,得到680个白色克隆,随机调取96个白色克隆,再经聚合酶链反应方法快速筛选出阳性重组质粒91个,从而成功地构建了亚健康肾阴虚证的DNA消减文库。结论:抑制性消减杂交技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建亚健康肾阴虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆亚健康肾阴虚证相关基因奠定了基础。

关 键 词:肾阴虚  杂交  基因文库
文章编号:1671-5926(2005)19-0097-03
修稿时间:2004-06-08

Construction of DNA subtractive library of deficiency of kidney yin at sub-health state for Chinese Han people
DAI Fang-guo,Zhao Xiao-shan,LUO Ren,ZHANG Xi-qian,Luo Yun-jian,CUI Li-juan,Fu Ting-ting. Construction of DNA subtractive library of deficiency of kidney yin at sub-health state for Chinese Han people[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2005, 9(19): 97-99
Authors:DAI Fang-guo  Zhao Xiao-shan  LUO Ren  ZHANG Xi-qian  Luo Yun-jian  CUI Li-juan  Fu Ting-ting
Abstract:
Keywords:
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