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可分泌性胰高血糖素样肽1融合蛋白cDNA克隆的构建
引用本文:娄明武,尹学念,王绍娟,张国斌,胡卫东,刘静华,庞丽梅,王继萍,王全颖. 可分泌性胰高血糖素样肽1融合蛋白cDNA克隆的构建[J]. 中国组织工程研究与临床康复, 2006, 10(40): 75-77
作者姓名:娄明武  尹学念  王绍娟  张国斌  胡卫东  刘静华  庞丽梅  王继萍  王全颖
作者单位:1. 深圳市龙岗中心医院介入影像科,广东省,深圳市,518116
2. 北华大学,吉林省,吉林市,132013
3. 吉林大学第一临床学院放射科,吉林省,长春市,130021
4. 西安市华广生物工程有限公司,陕西省,西安市,710000
基金项目:广东省科学技术厅项目(2005B36001082),深圳市科技和信息局项目(JH200505260306A),深圳市重点学科基金资助项目~~
摘    要:目的:为了探讨体内分泌表达胰高血糖素样肽1(GLP-1)治疗2型糖尿病的可行性,构建可分泌表达胰高血糖素样肽1的cDNA克隆。方法:实验于2005-09/2006-04在西安华广生物工程公司实验室进行。采用非对称互补引物/膜板法,体外合成两端含有酶切位点的胰高血糖素样肽1的cDNA片段,通过用NaeI和XhoI内切酶消化从NT4cDNA克隆中获取NT4的信号肽和前导序列,通过T4连接酶连接构建分泌表达胰高血糖素样肽1的cDNA克隆。该克隆的特点是确保信号肽酶识别点的正确性。结果:测序证实克隆的胰高血糖素样肽1的cDNA与GeneBank提供的序列完全一致;经限制性内切酶物理图谱方法证实已经成功地将胰高血糖素样肽1cDNA重组到含NT4的信号肽和前导序列下游。DNAsis软件分析结果表明该克隆编码具有信号肽酶识别点的NT4-GLP-1融合蛋白。结论:成功构建了能够分泌表达胰高血糖素样肽1的融合蛋白的cDNA克隆。

关 键 词:胰高血糖素  神经生长因子类  重组融合蛋质类  糖尿病  2型  基因疗法
文章编号:1671-5926(2006)40-0075-03
修稿时间:2006-06-02

Construction of cDNA clone of the secretory glucagon-like peptide-1 fusion protein
Lou Ming-wu,Yin Xue-nian,Wang Shao-juan,Zhang Guo-bin,Hu Wei-dong,Liu Jing-hua,Pang Li-mei,Wang Ji-ping,Wang Quan-ying. Construction of cDNA clone of the secretory glucagon-like peptide-1 fusion protein[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research, 2006, 10(40): 75-77
Authors:Lou Ming-wu  Yin Xue-nian  Wang Shao-juan  Zhang Guo-bin  Hu Wei-dong  Liu Jing-hua  Pang Li-mei  Wang Ji-ping  Wang Quan-ying
Abstract:
Keywords:
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