| 酵母双杂交诱饵蛋白LASS1融合表达质粒的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 刘居理,傅玉才,许铭炎,许锦阶.酵母双杂交诱饵蛋白LASS1融合表达质粒的构建及鉴定[J].中国老年学杂志,2008,28(24):2406-2409. |
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| 作者姓名： | 刘居理 傅玉才 许铭炎 许锦阶 |
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| 作者单位： | 刘居理 (汕头大学医学院细胞衰老实验室,广东,汕头,515041)； 傅玉才 (汕头大学医学院细胞衰老实验室,广东,汕头,515041)； 许铭炎 (汕头大学医学院细胞衰老实验室,广东,汕头,515041)； 许锦阶 (汕头大学医学院细胞衰老实验室,广东,汕头,515041)； |
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| 基金项目： | 广东省卫生厅医学科研基金
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| 摘 要： | 目的 构建酵母双杂交系统诱饵蛋白大鼠LASS1融合表达质粒,为进一步筛选大鼠脑神经元内与LASS1p相互作用的蛋白奠定基础.方法 应用PCR方法获得大鼠LASS1基因2个片段,分别克隆入酵母双杂交系统诱饵蛋白质粒载体pGBKT7,转染酵母菌AH109并检测重组质粒的自激活现象及毒性.利用Western印迹检测重组质粒在AH109的表达情况.结果 LASS1基因的PCR产物片段大小分别为Flag(111 bp)、Slag(109 bp);Western印迹结果表明2个重组质粒表达的蛋白均可以与抗c-Myc抗体在22 kU处特异性反应;重组质粒转化酵母后无自激活作用.结论 重组质粒pGBKT7-Flag、pGBKT7-Slag均能够在AH109内正确表达,可作为酵母双杂交系统诱饵蛋白使用.
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| 关 键 词： | 酵母双杂交 诱饵蛋白 |
Construction and verification of bait protein LASS1-fusion expression plasmid in yeast two-hybrid system |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | LASS1 |
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