| JNK3重组腺病毒促进表柔比星诱导的人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡 |
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| 引用本文： | 韩卿,宋方洲,易发平,卜友泉,王治东,李长燕,杨晓明.JNK3重组腺病毒促进表柔比星诱导的人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡[J].第二军医大学学报,2008,29(12):1460-1465. |
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| 作者姓名： | 韩卿 宋方洲 易发平 卜友泉 王治东 李长燕 杨晓明 |
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| 作者单位： | 1. 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室,重庆,400016
2. 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30671008),重庆市自然科学基金重点项目(CSTC2007BA5012),国家外专局项目(20075000019). |
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| 摘 要： | 目的:构建人JNK3基因重组腺病毒,检测其对人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖的影响；以表柔比星作为凋亡诱导剂,检测其对细胞凋亡的影响。方法:以pDBLeu-JNK3质粒为模板PCR扩增人JNK3基因全长,构建重组穿梭载体pAdTrack-CMV-JNK3,线性化后与骨架载体pAdEasy-1在细菌BJ5183内同源重组,在HEK293细胞中进行病毒包装和扩增,经PCR方法鉴定后,用包装后的病毒上清感染人成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞,Western印迹方法检测JNK3蛋白的表达；MTT实验检测其对细胞增殖的影响；流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳检测表柔比星诱导的细胞凋亡情况。结果:核酸测序和PCR鉴定表明成功构建Ad-JNK3,终点稀释试验测定扩增的腺病毒滴度为6.5×1010 pfu/ml；Ad-JNK3在SH-SY5Y细胞中表达JNK3蛋白；MTT检测结果表明Ad-JNK3可抑制SH-SY5Y细胞生长,抑制率为28.08%；流式细胞术结果表明Ad-JNK3可明显促进表柔比星诱导的细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳可观察到DNA梯形条带。结论:重组腺病毒Ad-JNK3能显著抑制SH-SY5Y细胞增殖,促进表柔比星诱导的SH-SY5Y细胞凋亡,为研究JNK3的作用机制及将其用于人成神经细胞瘤的基因治疗提供了条件。
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| 关 键 词： | JNK丝裂原活化蛋白激酶类 重组腺病毒 表柔比星 人成神经细胞瘤 细胞凋亡 |
| 收稿时间： | 2008/5/22 0:00:00 |
| 修稿时间： | 7/21/2008 8:55:47 PM |
JNK3 recombinant adenovirus promotes apoptosis of human neuroblastoma SH-SY5Y cells induced by epirubicin |
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| HAN Qing,SONG Fang-zhou,YI Fa-ping,BU You-quan,WANG Zhi-dong,LI Chang-yan,YANG Xiao-ming.JNK3 recombinant adenovirus promotes apoptosis of human neuroblastoma SH-SY5Y cells induced by epirubicin[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2008,29(12):1460-1465. |
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| Authors: | HAN Qing SONG Fang-zhou YI Fa-ping BU You-quan WANG Zhi-dong LI Chang-yan YANG Xiao-ming |
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| Institution: | 1.Department of Biochemistry and Molecular Biology,Key Laboratory of Clinical Laboratory Diagnostics of Ministry of Education,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China*2.Institute of Radiation Medicine,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | JNK mitogen-activated protein kinases recombinant adenovirus epirubicin human neuroblastoma apoptosis |
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