脂联素对脂肪细胞条件培养基促系膜细胞合成转化生长因子β1的作用

目的 探讨脂联素对脂肪细胞条件培养基促系膜细胞(MsMC)合成转化生长因子β1(TGFβ1)的作用.方法 将MsMC分为7组:A组加入无血清DMEM培养基;B组加入脂肪细胞条件培养基;C组加入pSuper质粒转染后条件培养基;D组加入pcDNA3.1(-)质粒转染后条件培养基;E组加入脂联素siRNA-pSuper表达质粒转染后条件培养基;F组加入脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒转染后条件培养基;C组加入添加3 mg/L脂联素的脂肪细胞条件培养基.用脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒、脂联素siRNA-pSuper表达质粒、pcDNA3.1(-)质粒及pSuper质粒分别转染3T3-L1细胞(脂质体2000转染法),诱导细胞分化为成熟脂肪细胞后收集细胞,以蛋白质印迹法检测细胞裂解液中脂联素蛋白含量.孵育MsMC 9 h后,收取细胞,用实时定量聚合酶链反应检测细胞裂解液中TGFβ1 mRNA水平;孵育24 h后收取上清液,用酶联免疫吸附试验检测上清液中TGFβ1蛋白质水平.结果 与未转染的成熟脂肪细胞比较,用脂联素pcDNA3.1(-)表达质粒转染3T3-L1细胞得到的成熟脂肪细胞的细胞裂解液中脂联素含量增加(0.59±0.06)比(0.21±0.02)],差异有统计学意义(P＜0.05);用脂联素siRNA-pSuper表达质粒转染3T3-L1细胞得到的成熟脂肪细胞的细胞裂解液中脂联素含量减少(0.12±0.01)比(0.39±0.02)],差异有统计学意义(P＜0.05).B组TGFβ1 mRNA水平及蛋白质表达含量高于A、F、G组TGFβ1 mRNA:(3.09 ±0.15)比(1.50±0.35)、(2.1±0.53)、(1.8±0.42),TGFβ1蛋白质水平:(708±10)比(224±16)、(382±11)、(300 ±25)],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 脂肪细胞条件培养基可刺激系膜细胞合成TGFβ1,而脂联素对这一效应具有明显抑制作用.