| 细粒棘球蚴抗原B表位结构的预测分析和多表位重组抗原的构建 |
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| 引用本文： | 江莉,张耀光,蒋守富,冯正. 细粒棘球蚴抗原B表位结构的预测分析和多表位重组抗原的构建[J]. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2012, 0(4): 279-283 |
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| 作者姓名： | 江莉 张耀光 蒋守富 冯正 |
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| 作者单位： | 上海市疾病预防控制中心;上海市预防医学研究院;中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所,卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室;世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No.30872211)~~ |
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| 摘 要： | 目的对细粒棘球蚴抗原B(EgAgB)的3个亚单位(EgAgB1、EgAgB2和EgAgB4)的反应性表位的结构进行预测分析并进行基因重组,鉴定构建的多表位重组抗原的反应性。方法用Bioedit和Discovery Studio Visualizer分析软件和I-TASSER在线服务器对EgAgB1、EgAgB2和EgAgB4等3个亚单位抗原序列及其不同组合方式的组合序列进行分析和结构预测。选择结构预测评分较高的表位或亚单位组合方式进行基因重组。设计特异性重叠引物,用重叠延伸PCR技术扩增目标序列。将目标序列克隆至pET32a(+)载体中构建表达质粒表达重组蛋白,表达产物经纯化后即为多表位重组抗原。采用蛋白质印迹(Western blotting)分析鉴定多表位重组抗原的反应性。结果结构预测显示,EgAgB1、EgAgB2和EgAgB4等3个亚单位的主要表位均呈"Z"字型结构,且主要表位区域亦均位于序列的中部;对拟进行组合的3个EgAgB亚单位和4个主要表位(KK36、RK30、B4-2和B4-3)的57种不同的组合方式进行了结构预测,选择6种组合方式进行重组表达。对6个多表位重组抗原(MEA-8、MEA-20、MEA-26、MEA-36、MEA-49和MEA-52)进行的Western blotting分析显示,多表位重组抗原与细粒棘球蚴病患者血清的反应条带明显强于AgB亚单位抗原。结论构建的6个多表位重组抗原与细粒棘球蚴病患者血清的反应性明显强于EgAgB亚单位抗原。
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| 关 键 词： | 细粒棘球绦虫 抗原B亚单位 结构预测 多表位抗原 |
Epitope Structure Prediction of Antigen B of Echinococcus granulosus and Construction of Multi-epitope Recombinant Antigen |
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| JIANG Li,ZHANG Yao-guang,JIANG Shou-fu,FENG Zheng. Epitope Structure Prediction of Antigen B of Echinococcus granulosus and Construction of Multi-epitope Recombinant Antigen[J]. Chinese Journal of Parasitology and Parasitic Diseases, 2012, 0(4): 279-283 |
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| Authors: | JIANG Li ZHANG Yao-guang JIANG Shou-fu FENG Zheng |
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| Affiliation: | 1 Shanghai Municipal Center for Disease Control and Prevention,Shanghai Institutes of Preventive Medicine,Shanghai 200336,China;2 National Institute of Parasitic Diseases,Chinese Center for Disease Control and Prevention;Key Laboratory of Parasite and Vector Biology,MOH;WHO Collaborating Centre for Malaria,Schistosomiasis and Filariasis,Shanghai 200025,China) |
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