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肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体的构建及其在前列腺癌细胞中的RNA干涉作用
引用本文:沈建军,李斌,龙敏,姜南艳,林芳,何婷,张惠中.肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体的构建及其在前列腺癌细胞中的RNA干涉作用[J].现代肿瘤医学,2013,0(9):1941-1945.
作者姓名:沈建军  李斌  龙敏  姜南艳  林芳  何婷  张惠中
作者单位:第四军医大学唐都医院临床实验与检验、输血科,陕西 西安 710038
基金项目:陕西省社会发展科技攻关计划资助项目(编号:2010K14-02-12)
摘    要:目的:构建含Survivin基因启动子的、肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体,研究该载体在前列腺癌细胞中的RNA沉默作用。方法:运用分子克隆技术,选取Survivin、Livin基因RNAi特异性序列,构建以Survivin、Livin基因为靶点的、含Survivin启动子的CGM30 miR-30 shRNA载体。经测序验证,用脂质体法转染PC-3细胞,RT-PCR、免疫印迹实验检测Survivin、Livin的表达变化,并用流式细胞术检测转染后PC-3细胞的凋亡变化。结果:构建的共沉默RNAi重组载体转染PC-3细胞后,Survivin、Livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达均明显下调(P<0.01),且转染后的细胞凋亡增加了约15%,而正常前列腺上皮BPH-1细胞中则无此作用。结论:成功构建了含Survivin启动子、特异性沉默Survivin、Livin基因表达的RNAi共沉默载体CGM30-SP-svv-liv,转染该重组质粒后可促进肿瘤细胞的凋亡。

关 键 词:RNA干扰  存活素  生存素  凋亡  前列腺癌

The construction of recombinant RNAi vector of Survivin and Livin and inhibition Survivin and Livin gene expression in PC-3 cells
Shen Jianjun;Li Bin;Long Min;Jiang Nanyan;Lin Fang;He Ting;Zhang Huizhong.The construction of recombinant RNAi vector of Survivin and Livin and inhibition Survivin and Livin gene expression in PC-3 cells[J].Journal of Modern Oncology,2013,0(9):1941-1945.
Authors:Shen Jianjun;Li Bin;Long Min;Jiang Nanyan;Lin Fang;He Ting;Zhang Huizhong
Institution:Department of Clinical Laboratory,Tangdu Hospital,Fourth Military Medical University,Shaanxi Xi'an 710038,China.
Abstract:
Keywords:RNA interference  Survivin  Livin  apoptosis  prostate cancer
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