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M-CSF和RANKL体外诱导培养小鼠破骨样细胞及其骨吸收功能的动态观察
引用本文:孙继芾,沈铁城,黄永辉,江红卫. M-CSF和RANKL体外诱导培养小鼠破骨样细胞及其骨吸收功能的动态观察[J]. 中国骨质疏松杂志, 2011, 17(5): 378-381
作者姓名:孙继芾  沈铁城  黄永辉  江红卫
作者单位:江苏大学附属医院,江苏省镇江市,212001
摘    要:目的以巨噬细胞集落刺激因子(Macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)和核因子κB受体激动剂配体(Ligand of receptor activator of NF-κB,RANKL)联合体外诱导小鼠骨髓干细胞分化为破骨样细胞,并对其骨吸收功能进行动态观察。方法分离小鼠四肢骨获取骨髓干细胞,以M-CSF和RANKL诱导培养,将盖玻片及骨磨片置入培养基内,在诱导培养的第3,6,9天分别对盖玻片行抗酒石酸酸性磷酸酶(The tartrate-resistant acid phosphatase TRAP)染色,观察细胞形态和染色情况,并计算破骨样细胞数量;同时对骨磨片进行骨吸收陷窝的观察。结果诱导培养3 d后出现含TRAP(+)颗粒的细胞,可见淡染单核和双核;诱导培养6 d后可见TRAP(+)细胞较诱导培养3 d时增多,仍以双核为主;诱导培养9 d后出现多核巨型TRAP(+)细胞,细胞核达到3个以上。并且随着诱导培养的时间延长,破骨样细胞数量逐渐增长。诱导培养第3,6天骨磨片上均未发现骨吸收陷窝,第九天出现不同形态的呈蓝紫色的吸收陷窝。结论 M-CSF和RANKL联合体外诱导小鼠骨髓干细胞形成破骨样细胞是一种有效的诱导培养方法,本实验在诱导培养第九天发现破骨样细胞具有骨吸收功能。

关 键 词:M-CSF  RANKL  破骨细胞  细胞培养

Dynamic observation of the culture and bone resorption function of osteoclast-like cells induced by M-CSF and RANKL in vitro
Affiliation:SUN Jifu,SHEN Tiecheng,HUANG Yonghui,et al.Department of Orthopedics,the Affiliated Hospital of Jiangsu University,Zhenjiang 212001,China
Abstract:
Keywords:M-CSF  RANKL
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