FQ-PCR同步检测HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ方法的建立及临床应用 |
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引用本文: | 陈琦,唐景峰,程鹏飞,张长明,周立,汪晓莉,王业富.FQ-PCR同步检测HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ方法的建立及临床应用[J].武汉大学学报(医学版),2012,33(5):667-672. |
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作者姓名: | 陈琦 唐景峰 程鹏飞 张长明 周立 汪晓莉 王业富 |
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作者单位: | 1. 武汉科技大学附属天佑医院检验科 湖北武汉430064 2. 武汉大学生命科学院 湖北武汉430072 3. 武汉大学医院 湖北武汉430072 4. 武汉百泰基因工程有限公司 湖北 武汉430072 |
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基金项目: | 湖北省科技攻关项目(编号:2007AA302B05) |
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摘 要: | 目的:建立可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,并对所建体系进行方法学评价.方法:根据HTLV-Ⅰ pol基因和HTLV-Ⅱtax基因的保守序列设计引物及TaqMan-LNA探针,构建重组质粒作为荧光定量PCR的标准品.优化荧光定量PCR反应条件,建立起可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR (FQ-PCR)的方法.结果:结果显示该方法对HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ的线性范围分别为108-102 copy/μl和107-10 copy/μl;检测灵敏度分别为102copy/μl和10 copy/μl.对阳性标本检测均呈阳性,对非目标菌检测均呈阴性.应用该方法对175例临床标本进行考核,有HTLV-Ⅰ阳性6例,HTLV-Ⅱ阳性3例,其中HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ双阳性2例.结论:本研究建立的双重FQ-PCR方法特异、快速、灵敏,对HTLV的血液筛查有重要意义.
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关 键 词: | 人嗜T淋巴细胞病毒 人嗜T淋巴细胞病素-Ⅰ型相关性脊髓病 热带痉挛性截瘫 荧光定量PCR |
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