| 微小RNA-29a-3p调节卷曲蛋白4表达影响高脂血症大鼠种植体骨整合的实验研究 |
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| 引用本文： | 刘飞,王志峰,刘芳芳,徐巾诏,刘奇博,蓝菁.微小RNA-29a-3p调节卷曲蛋白4表达影响高脂血症大鼠种植体骨整合的实验研究[J].华西口腔医学杂志,2019,37(2):200-207. |
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| 作者姓名： | 刘飞 王志峰 刘芳芳 徐巾诏 刘奇博 蓝菁 |
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| 作者单位： | 山东大学口腔医学院修复教研所,山东省口腔组织再生重点实验室;山东大学口腔医院儿童牙病科,山东省口腔组织再生重点实验室,济南 250012;南阳市口腔医院种植科,南阳,473000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81671025);山东省科技发展计划(2015GSF118186) |
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| 摘 要： | 目的研究microRNA-29a-3p(miR-29a-3p)对高脂环境下大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化和高脂血症大鼠种植体骨整合的影响及其作用位点。方法 1)体外实验:对BMSCs分别进行普通和高脂成骨诱导,通过逆转录实时定量聚合酶链反应和Western blot检测miR-29a-3p及成骨相关因子碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关基因2(Runx2)的基因和蛋白质表达;高脂培养的BMSCs分别转染miR-29a-3p模拟物、抑制物及阴性对照(NC)质粒,RT-qPCR检测miR-29a-3p、ALP及Runx2基因表达情况,Western blot检测ALP、Runx2蛋白表达情况。通过靶基因预测软件(Target Scan、MiRNA.org等)预测miR-29a-3p与成骨相关的靶基因为卷曲蛋白4(Fzd4),双荧光素酶报告检测miR-29a-3p与Fzd4的相互作用关系。2)体内实验:高脂血症大鼠为实验组,普通大鼠为对照组,两组分别植入种植体,检测种植体周围骨组织中miR-29a-3p、ALP、Runx2的表达差异;行种植体-骨组织的硬组织切片,亚甲基蓝-酸性品红染色,进行组织学观察。分别将miR-29a-3p过表达慢病毒载体及空白对照慢病毒载体注射入高脂血症大鼠,种植体植入后3、10 d检测种植体周围骨组织中ALP、Runx2的表达变化以研究miR-29a-3p对高脂血症大鼠成骨的作用。结果高脂组与普通组相比,ALP、Runx2和miR-29a-3p表达下调,BMSCs成骨分化能力下降。miR-29a-3p模拟物组与抑制物组相比,ALP、Runx2表达升高,BMSCs成骨分化能力增强。体内实验也得到了相似结果。双荧光素酶报告基因分析证实miR29a-3p通过直接结合3’-UTR抑制Fzd4表达。结论miR-29a-3p对高脂环境下大鼠BMSCs成骨分化起正向调节作用,可直接与Fzd4结合调节成骨分化;mi R-29a-3p能够促进高脂血症大鼠种植体周围成骨标志基因的表达,有利于骨整合。
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| 关 键 词： | 微小RNA-29a-3p 高脂血症 卷曲蛋白4 双荧光素酶报告基因 骨整合 |
| 收稿时间： | 2018-10-30 |
| 修稿时间： | 2019-01-05 |
MicroRNA-29a-3p regulates osteoblast differentiation and peri-implant osseointegration in a rat model of hyperlipidemia by modulating Frizzled 4 expression |
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| Fei Liu,Zhifeng Wang,Fangfang Liu,Jinzhao Xu,Qibo Liu,Jing Lan.MicroRNA-29a-3p regulates osteoblast differentiation and peri-implant osseointegration in a rat model of hyperlipidemia by modulating Frizzled 4 expression[J].West China Journal of Stomatology,2019,37(2):200-207. |
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| Authors: | Fei Liu Zhifeng Wang Fangfang Liu Jinzhao Xu Qibo Liu Jing Lan |
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| Institution: | 1. Dept. of Prosthodontics, School of Stomatology, Shandong University, Shandong Provincial Key Laboratory of Oral Tissue Regeneration, Jinan 250012, China2.Dept. of Pediatric Dentistry, School of Stomatology, Shandong University, Shandong Provincial Key Laboratory of Oral Tissue Regeneration, Jinan 250012, China3.Dept. of Dental Implantology, Stomatological Hospital of Nanyang, Nanyang 473000, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | microRNA-29a-3p hyperlipidemia Frizzled 4 dual luciferase reporter gene osteointegration |
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