| 腺病毒介导的人端粒酶反转录酶牙周膜细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 孙贵军,秦晓东,王世琴,胡慧珍,陆笑颜,金佳佳,吴生荣,何祥一. 腺病毒介导的人端粒酶反转录酶牙周膜细胞系的建立[J]. 华西口腔医学杂志, 2019, 37(1): 25-30. DOI: 10.7518/hxkq.2019.01.005 |
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| 作者姓名： | 孙贵军 秦晓东 王世琴 胡慧珍 陆笑颜 金佳佳 吴生荣 何祥一 |
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| 作者单位： | 兰州大学口腔医学研究所,兰州,730000;中国农业科学院兰州兽医研究所,兰州,730000 |
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| 基金项目： | 甘肃省自然科学基金(17JR5RA217) |
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| 摘 要： | 目的 通过腺病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶反转录酶（hTERT）基因的牙周膜细胞系,以构建腺病毒介导的高效、稳定的hTERT牙周膜细胞系。方法 聚合酶链反应（PCR）法扩增hTERT基因编码序列,构建同源重组腺病毒质粒pAd-pshuttle-cmv-hTERT,收集腺病毒颗粒后感染人牙周膜细胞,实时荧光定量PCR检测hTERT及成骨相关基因碱性磷酸酶、核心结合因子2、骨涎蛋白、骨钙素、骨桥素、Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达水平,茜素红染色观察成骨分化能力,CCK-8检测细胞增殖能力。结果 成功构建了含hTERT基因的腺病毒颗粒并感染牙周膜细胞,感染细胞与正常牙周膜细胞形态相似;实时荧光定量PCR结果显示hTERT及成骨相关基因在感染细胞中高表达;茜素红染色显示牙周膜细胞系成骨能力强;CCK-8结果示牙周膜细胞系增殖能力强。结论 通过腺病毒法成功建立了过表达hTERT的人牙周膜细胞系,其具有较强的成骨分化能力,这为研究牙周膜再生机制提供了一个理想的细胞系。
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| 关 键 词： | 牙周膜细胞 人端粒酶反转录酶 腺病毒 稳定表达 成骨分化 |
| 收稿时间： | 2018-01-11 |
| 修稿时间： | 2018-05-09 |
Construction of human telomerase reverse transcriptase periodontal ligament cell line mediated by adenovirus |
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| Guijun Sun,Xiaodong Qin,Shiqin Wang,Huizhen Hu,Xiaoyan Lu,Jiajia Jin,Shengrong Wu,Xiangyi He. Construction of human telomerase reverse transcriptase periodontal ligament cell line mediated by adenovirus[J]. West China journal of stomatology, 2019, 37(1): 25-30. DOI: 10.7518/hxkq.2019.01.005 |
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| Authors: | Guijun Sun Xiaodong Qin Shiqin Wang Huizhen Hu Xiaoyan Lu Jiajia Jin Shengrong Wu Xiangyi He |
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| Affiliation: | 1. Research Institute of Stomatology, Lanzhou University, Lanzhou 730000, China2. Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730000, China |
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