| 人乳腺癌转移抑制基因真核表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 杨怀成,揭志刚,刘逸,李正荣,向德雨.人乳腺癌转移抑制基因真核表达载体的构建及鉴定[J].中国基层医药,2009,16(9):1539-1541. |
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| 作者姓名： | 杨怀成 揭志刚 刘逸 李正荣 向德雨 |
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| 作者单位： | 1. 淮南市第一人民医院普外科,安徽省淮南,232007
2. 南昌大学第一附属医院胃肠外科 |
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| 摘 要： | 目的构建乳腺癌转移抑制基因（BRMS1）的真核表达载体pcDNA3．1（-）B／myc-BRMSI，为进一步研究恶性肿瘤的转移机制及基因治疗提供物质基础。方法常规方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7，Trizd法提取细胞株总RNA；设计一对特异性引物，经过逆转录反应获得BIIMS1 cDNA的CDS序列，连接到质粒pcDNA3．1／mye—His（-）B上，构建BRMS1的真核表达载体peDNA3．1（-）B／myc．BRMS1，行基因测序鉴定正确后转染人胚肾细胞HEK-293，行Westernblot验证其是否表达。结果重组质粒pcDNA3．1（-）B／myc-BRMS1经双酶切及基因测序分析，验证了克隆的人BRMS1基因cDNA序列与GenBankAF159141]公布的人BRMS1基因的cDNA序列吻合，重组体peDNA3．1（-）B／myc—BRMS1中插入的目的基因BRMS1是正向、单倍插入。结论成功构建了BRMS1真核表达载体pcDNA3．1（-）B／myc—BRMS1，为深入研究BRMS1基因功能和BRMS1基因治疗奠定了物质基础。
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| 关 键 词： | 基因 肿瘤抑制 基因 BRMS 1 基因重排 |
Construction and identification of eukaryotic expression vector for human breast-cancer metastasis suppressor 1(BRMS1) |
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| YANG Huai-cheng,JIE Zhi-gang,LIU Yi,LI Zheng-rong,XIANG De-yu.Construction and identification of eukaryotic expression vector for human breast-cancer metastasis suppressor 1(BRMS1)[J].Chinese Journal of Primary Medicine and Pharmacy,2009,16(9):1539-1541. |
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| Authors: | YANG Huai-cheng JIE Zhi-gang LIU Yi LI Zheng-rong XIANG De-yu |
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| Institution: | YANG Huai-cheng ,JIE Zhi-gang,LIU Yi,LI Zheng-rong,XIANG De-yu. ( Department of General surgery, The first people＇s hospital of Huainan ,Huainan, Anhui 232007, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Genes tumor suppressor Genes BRMS 1 Gene rearrangement |
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