| 基于全菌消减SELEX技术的体外筛选大肠埃希菌O157:H7适配体研究 |
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| 引用本文： | 许蕊,邱志刚,杨栋,金敏,刘伟丽,李君文,徐群英,袁兆康,谌志强.基于全菌消减SELEX技术的体外筛选大肠埃希菌O157:H7适配体研究[J].环境与健康杂志,2016(1). |
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| 作者姓名： | 许蕊 邱志刚 杨栋 金敏 刘伟丽 李君文 徐群英 袁兆康 谌志强 |
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| 作者单位： | 1. 南昌大学公共卫生学院,江西南昌300006;军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室;2. 军事医学科学院卫生学环境医学研究所天津市环境与食品安全风险监控技术重点实验室;3. 南昌大学公共卫生学院,江西南昌,300006 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81270041) |
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| 摘 要： | 目的筛选出能特异性识别大肠埃希菌O157:H7的单链DNA(ss DNA)适配体并进行鉴定。方法利用全菌消减SELEX技术,以完整菌体为靶标菌和消减菌,通过体外筛选方法筛选出大肠埃希菌O157:H7特异性ss DNA适配体。利用荧光分光光度计、激光共聚焦显微镜、克隆测序、Chromas和DNAMAN分析软件,分析适配体的一、二级结构,并对筛选得到的适配体进行特异性鉴定。结果经过7轮全菌消减SELEX筛选,荧光分光光度计检测结果鉴定第六轮文库富集达到饱和;通过测序分析、荧光分光光度计和激光共聚焦显微镜特异性检测,获得1条与大肠埃希菌O157:H7特异性结合的适配体Aptamer1。结论利用全菌消减SELEX技术成功筛选获得大肠埃希菌O157:H7特异性ss DNA适配体。
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| 关 键 词： | 大肠埃希菌O157∶H7 适配体 全菌消减SELEX技术 特异性 |
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