| 猪链球菌2型疫苗候选分子FBP的表达及免疫学活性研究 |
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| 引用本文： | 刘丽娜,胡福泉,朱军民,赵岩,陈志瑾,唐家琪.猪链球菌2型疫苗候选分子FBP的表达及免疫学活性研究[J].免疫学杂志,2008,24(2):173-177. |
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| 作者姓名： | 刘丽娜 胡福泉 朱军民 赵岩 陈志瑾 唐家琪 |
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| 作者单位： | 1. 第三军医大学基础医学部微生物学教研室,重庆,400038
2. 第三军医大学基础医学部微生物学教研室,重庆,400038;南京军区军事医学研究所,南京,210002 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)
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国家自然科学基金 |
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| 摘 要： | 目的 表达SS2纤连蛋白结合蛋白(fibronectin-binding protein,FBP),研究其免疫学活性,探讨其保护活性和作为疫苗候选分子的可能性.方法 用PCR技术从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出fbp基因片段,插入表达载体pET-30b( )中,构建重组表达载体pET30b-fbp.该载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后,转化E.coli.Rosetta,IPIG诱导表达,镍离子亲和层析纯化重组蛋白.Western blot证实目的蛋白的分子量和免疫反应原性.重组蛋白免疫小鼠后收集多抗血清,间接ELISA检测其效价.结果 PCR扩增的fbp基因长度约为1700 bp,所构建重组表达载体酶切鉴定无误、测序证实碱基序列100%正确且保持正确读框.IPIG诱导表达,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的10%.亲和层析获得目的蛋白,纯度达80%以上.Western blot检测证实该蛋白能与感染SS2的病人血清发生阳性反应.重组蛋白免疫小鼠后血清效价达1:25600以上.结论 成功构建了表达载体pET30b-fbp,可在工程菌E.coli.Rosetta中表达;表达蛋白具有良好的免疫原性和反应原性.
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| 关 键 词： | SS2 FBP 表达 免疫学活性 |
| 文章编号： | 1000-8861（2008）02-0173-05 |
| 收稿时间： | 2007-11-06 |
| 修稿时间： | 2007-12-06 |
Expression and immunologic activity analysis of candidate protective antigen FBP of S.suis 2 |
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| LIU Li-na,HU Fu-quan,ZHU Jun-min,ZHAO Yan,CHEN Zhi-jin,TANG Jia-qi.Expression and immunologic activity analysis of candidate protective antigen FBP of S.suis 2[J].Immunological Journal,2008,24(2):173-177. |
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| Authors: | LIU Li-na HU Fu-quan ZHU Jun-min ZHAO Yan CHEN Zhi-jin TANG Jia-qi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | S suis 2 Fibmnectin-binding protein Expression Immunologic activity |
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