PSMA对LNCaP细胞生长、迁移及ERK蛋白活性的影响

目的: 利用我们已经成功沉默前列腺特异性膜抗原(PSMA)的LNCaP前列腺癌细胞株,探讨PSMA对LNCaP细胞磷酸化胞外信号调节激酶(ERK)及细胞生长、迁移的影响,为进一步研究PSMA在前列腺癌发展中的作用提供理论基础。方法: 实验对象包括携带可稳定抑制PSMA表达siRNA慢病毒的LNCaP细胞组(实验组),携带对任何基因无干扰作用siRNA慢病毒的LNCaP细胞组(空转组),同时建立未进行处理的普通LNCaP细胞组(对照组),分别对在一般培养基及添加ERK蛋白上游抑制剂的3组细胞,使用Western blotting和细胞免疫化学的方法检测MAPK/ERK蛋白活性,并用MTT描绘细胞生长曲线、Transwell观察细胞迁移情况。结果: 在一般培养基的3组细胞中,Western blotting提示实验组磷酸化ERK蛋白表达明显低于对照组和空转组;免疫细胞化学结果显示实验组染色明显比对照组和空转组弱,阳性细胞数较少;MTT绘制生长曲线,得到实验组细胞的增殖生长能力较对照组、空转组降低;Transwell结果提示实验组较对照组和空转组细胞的增殖迁移能力降低。在ERK磷酸化被抑制的情况下,3组细胞磷酸化ERK蛋白均低表达,MTT及Transwell检测显示其生长迁移能力都处于低水平,且与在一般培养基中实验组的效应类似。结论: 初步发现PSMA可能通过上调前列腺癌LNCaP细胞ERK蛋白的活性,从而在其生长、迁移中起正向调节作用。

Effect of prostate-specific membrane antigen on phospho-ERK, growth and migration of prostate cancer LNCaP cells

AIM:To study the expression of prostate-specific membrane antigen(PSMA) on the level of phospho-ERK,cell growth and migration of prostate cancer LNCaP cells.METHODS: The method of silencing PSMA was established by lentivirus-mediated RNAi in our early experiment.The cells were divided into 3 groups.In experimental group,the expression of PSMA in LNCaP cells was stably blocked by lentivirus-mediated RNAi.In negative control group,the cells were transfected with lentivirus-mediated control RNAi(without any in...