人胰岛素样生长因子—1在大肠杆菌中的表达 |
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引用本文: | 吴岚晓,李明,王萍,陈白虹.人胰岛素样生长因子—1在大肠杆菌中的表达[J].药物生物技术,2001,8(4):185-188. |
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作者姓名: | 吴岚晓 李明 王萍 陈白虹 |
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作者单位: | 第一军医大学热带医学研究所广州 510515 |
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基金项目: | 国家科委新药开发项目(1035计划):编号96-901-01-57 |
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摘 要: | 为获得大量的人胰岛素样生长因子-1(human Insulin-like Growth Factor-1,hIGF-1)产品,构建了hIGF-1原核表达系统。设计引物,引入Nde I和Hind Ⅲ酶切位点,以人工合成构建的pUCIGF质粒为模板,CR扩增hIGF-1基因。酶切后,克隆于原核表达载体pRSET B中,构建pRSET-IGF重组质粒,转化入肠杆菌BL21(DE3)进行表达。带有重组质粒pRSET-IGF的大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明:可表达出相对分子质量78000的蛋白,重组蛋白以非融合、可溶性形式表达,表达量占菌体总蛋白量的10%~20%,Western印记表明重组蛋白具有hIGF-1的抗原活性。构建的pRSET-IGF重组质粒成功地在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶性表达,为获得大量基因工程产品奠定了基础。
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关 键 词: | 胰岛素样生长因子-1 克隆 原核表达 人 大肠杆菌 细胞调控因子 基因工程 |
文章编号: | 1005-8915(2001)04-0185-04 |
Expression of Human Insulin-Like Growth Factor 1 in Escherichia coli. |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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