丙型肝炎NSSATP6基因原核表达载体的构建和表达纯化及多克隆抗体的制备 |
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引用本文: | 郑铁龙,成军,洪源.丙型肝炎NSSATP6基因原核表达载体的构建和表达纯化及多克隆抗体的制备[J].实用肝脏病杂志,2008,11(1):2-6. |
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作者姓名: | 郑铁龙 成军 洪源 |
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作者单位: | [1]军事医学科学院2005级在读硕士,北京市100039 [2]北京地坛医院传染病研究所,北京市100039 |
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摘 要: | 目的构建丙型肝炎病毒NS5A蛋白反式激活蛋白6基因的原核表达载体并进行表达、鉴定。方法从已构建的pGBKT7-NS5ATP6质粒上切取NS5ATP6基因,再克隆入pET32a(+)质粒,构建pET32a(+)-NS5ATP6表达重组体。结果以pET32a(+)-NS5ATP6重组体分别转化DH5a和Rosseta大肠埃希菌后,经IPTG诱导,pET32a(+)-NS5ATP6表达出分子量为41KD左右的重组蛋白。免疫动物并经Westernblot检测证实其具有良好的抗原性。结论成功地构建了原核表达载体pET32a(+)-NS5ATP6,诱导表达和纯化了NS5ATP6融合蛋白,并制备了该蛋白的多克隆抗体,为下一步该基因功能研究奠定了基础。
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关 键 词: | 丙型肝炎病毒 NS5ATP6基因 原核表达 |
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