细胞凋亡相关新基因Apr-3的一个转录剪接体的克隆、初步表达及纯化 |
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引用本文: | 张静,王文亮,晏伟,张志培,李擒龙,王丽.细胞凋亡相关新基因Apr-3的一个转录剪接体的克隆、初步表达及纯化[J].现代肿瘤医学,2006,14(7):781-783. |
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作者姓名: | 张静 王文亮 晏伟 张志培 李擒龙 王丽 |
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作者单位: | 第四军医大学西京医院病理科,陕西,西安,710032 |
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摘 要: | 目的克隆Apr-3基因的一个转录剪接体,进行原核表达,并进行初步纯化。方法培养HL-60细胞,提取HL-60细胞总RNA,应用RT-PCR获取Apr-3编码区cDNA序列的前366bp,将该cDNA与质粒pcDNA3.0连接,构建克隆载体,将其转化E.coliDH5α,进行测序,与GenBank中登录序列比对,结果正确后将该cDNA与质粒pET28a连接,构建原核表达载体,转化大肠杆菌,诱导表达获得Apr-3蛋白。结果对测序结果进行序列分析,与GenBank中登录的Apr-3编码区完全一致。Apr-3融合蛋白主要以包涵体形式存在。结论成功构建了Apr-3的原核表达载体,获得了较纯的Apr-3融合蛋白。
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关 键 词: | Apr-3 细胞凋亡 转录剪接体 克隆 表达 融合蛋白 |
文章编号: | 1672-4992-(2006)07-0781-03 |
收稿时间: | 2005-11-24 |
修稿时间: | 2005年11月24 |
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