| PAI siRNA表达载体的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 杜建时,赵晴,张静菊,王嘉桔.PAI siRNA表达载体的构建及鉴定[J].中国老年学杂志,2007,27(15):1439-1441. |
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| 作者姓名： | 杜建时 赵晴 张静菊 王嘉桔 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学中日联谊医院血管外科,吉林,长春,130031
2. 吉林大学中日联谊医院神经内科 |
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| 基金项目： | 吉林省科技厅应用基础项目（200505152） |
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| 摘 要： | 目的 构建和鉴定针对PAI 的发卡样小干扰RNA（siRNA）真核表达载体PAI siRNA.方法 人工合成一对互补并编码相应短发夹状PAI siRNA 的寡核苷酸链, 将其插入到pSilencerTM 2.1-U6 neo 载体中,经测序鉴定所构建的重组载体是否正确;采用电转染法将构建的重组载体导入人肝癌细胞HpG2中, 采用逆转录聚合酶链反应 （RT-PCR） 、West ern印迹法分别检测转染细胞PAI mRNA 和蛋白的表达.结果 经测序证明PAI siRNA 序列正确;转染PAI siRNA 载体后,HpG2细胞PAI mRNA 和蛋白表达均较对照组明显下降（P ＜0.01）.结论 测序结果表明发卡样PAI siRNA 真核表达载体构建成功,转染Hp G2细胞后获得稳定表达,并可特异性封闭PAI的表达, 为进一步研究PAI siRNA 载体提供了实验基础.
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| 关 键 词： | 纤溶酶原激活物抑制剂-1 小干扰RNA（siRNA） 发卡样小干扰RNA HpG2 |
| 文章编号： | 1005-9202（2007）15-1439-03 |
| 收稿时间： | 2006-11-12 |
| 修稿时间： | 2007-03-20 |
Construction and identification of PAI siRNA expression vector |
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| DU Jian-Shi, ZHAO Qing, ZHANG Jing-Ju,et al..Construction and identification of PAI siRNA expression vector[J].Chinese Journal of Gerontology,2007,27(15):1439-1441. |
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| Authors: | DU Jian-Shi ZHAO Qing ZHANG Jing-Ju |
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| Institution: | Vascular Surgery, China-Japan Union Hospital of Jilin University, Changchun 130041, Jilin, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Plasminogen activator inhibitor (PAI) Small interfering RNA (siRNA) Hairpin siRNA Human liver cancer cell line HpG2 |
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