香烟诱导支气管上皮细胞外泌体释放miR-34a靶向CASP2促进肺成纤维细胞增殖

目的：研究香烟模拟物（cigarette smoke extract, CES）通过调控16 HBE支气管上皮细胞中外泌体miR-34a的表达，从而影响MRC-5肺成纤维细胞的增殖。方法：从市售香烟中制备CES，后将6HBE细胞经过CES处理，收集上清中的外泌体miR-34a用于MRC-5细胞培养；使用RT-PCR检测外泌体miR-34a的表达水平；MRC-5细胞增殖能力通过细胞计数试剂盒CCK-8测定；通过Western blot检测CASP2的表达，利用双荧光素酶验证miR-34a与CASP2基因的靶向结合。结果：透射电镜下，16 HBE上清液中的外泌体呈球状，粒径在100 nm左右；经过CES处理后，外泌体miR-34a的表达显著增加。进一步研究表明，通过CES诱导的外泌体miR-34a能够促进MRC-5细胞的增殖；miR-34a与CASP2存在靶向结合关系；miR-34a mimic显著抑制了CASP2的表达。结论：在CES诱导的16HBE细胞中，外泌体miR-34a通过与CASP2基因的靶向结合，对成纤维细胞增殖起着关键作用。