| 一种高效转染西藏小型猪胚胎成纤维细胞的方法 |
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| 引用本文： | 刘薇,陈燕,岳敏,袁进,邱添武,肖东,顾为望.一种高效转染西藏小型猪胚胎成纤维细胞的方法[J].中国比较医学杂志,2015,25(3):64-66. |
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| 作者姓名： | 刘薇 陈燕 岳敏 袁进 邱添武 肖东 顾为望 |
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| 作者单位： | 南方医科大学实验动物中心,南方医科大学1比较医学研究所暨实验动物中心,南方医科大学1比较医学研究所暨实验动物中心,南方医科大学1比较医学研究所暨实验动物中心,南方医科大学1比较医学研究所暨实验动物中心,南方医科大学1比较医学研究所暨实验动物中心 |
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| 基金项目： | 广东省科技计划项目（2013B060300013）、国家自然科学基金项目 (No. 31271042)、国家科技部国际合作项目（No. 2011DFA33290）、国家“973”项目（No. 2011CBA01006）、广东省科技基础条件建设项目（2012B061700099）、广东省科技计划项目（2012B011000004） |
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| 摘 要： | 目的应用Nucleofector II核转染仪将外源基因EGFP导入西藏小型猪胚胎成纤维细胞(PEFs),并与脂质体转染的方法进行比较,寻求一种高效转染猪胚胎成纤维细胞的方法。方法使用Lonza公司的Nucleofector II核转染仪,参考已报道的转染程序与相应的转染试剂,将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入西藏小型猪PEFs,并与脂质体转染的方法进行对比研究,比较两种方法的转染效率。结果转染5 h后,核转染仪组镜下即可见绿色荧光,转染效率高达80%,远远高于脂质体转染的方法。结论用Nucleofector II核转染仪能实现西藏小型猪PEFs的高效转染,为高效制备转基因克隆西藏小型猪提供了可靠的方法。
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| 关 键 词： | 西藏小型猪 胚胎成纤维细胞 转染 核转染 脂质体转染 |
| 收稿时间： | 2/4/2015 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2/4/2015 12:00:00 AM |
An efficient method which can be used to transfect Tibetan minipig embryonic fibroblasts |
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| LIU Wei,CHEN Yan,YUE Min,YUAN Jin,QIU Tian-wu,XIAO Dong and GU Wei-wang.An efficient method which can be used to transfect Tibetan minipig embryonic fibroblasts[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2015,25(3):64-66. |
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| Authors: | LIU Wei CHEN Yan YUE Min YUAN Jin QIU Tian-wu XIAO Dong and GU Wei-wang |
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| Institution: | Institute of Comparative Medicine & Laboratory Animal Center,,Institute of Comparative Medicine & Laboratory Animal Center,,Institute of Comparative Medicine & Laboratory Animal Center,,Institute of Comparative Medicine & Laboratory Animal Center,,Institute of Comparative Medicine & Laboratory Animal Center,Institute of Comparative Medicine & Laboratory Animal Center,,Institute of Comparative Medicine & Laboratory Animal Center, |
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| Abstract: | Objective: Transfect EGFP gene to porcine embryonic fibroblasts (PEFs) of Tibetan miniature pigs by Lonza Nucleofector II machine and compare the tansfection efficiency between this method and the lipofection method. Method: A plasmid carrying green fluorescent protein (GFP) was transfected into PEFs of Tibetan miniature pigs via the Lonza Nucleofector II machine (program U020) and by Lipofectamine 2000. Results: 5 hours after nucleofection, green fluorescence was observed, indicating 80% transfecting efficiency in the nucleofection group, which is significantly higher than the lipofection group. Conclusion: Nucleofector II machine can efficiently transfect PEFs, provides a reliable method for efficiently generate transgenic Tibetan minipigs. |
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| Keywords: | Tibetan miniature pigs Embryonic fibroblasts Transfection Nucleofection Lipofection |
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