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hGR小基因真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达
引用本文:唐辰虹,喻志强,刘荣玉. hGR小基因真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达[J]. 中国病理生理杂志, 2006, 22(8): 1660-1664. DOI: 1000-4718
作者姓名:唐辰虹  喻志强  刘荣玉
作者单位:1安徽医科大学第一附属医院干部呼吸内科,安徽 合肥 230032;2 中国科学技术大学生命科学院实验中心,安徽 合肥 230026
摘    要:目的:构建用于体内剪接分析的人糖皮质激素受体(hGR)小基因真核表达载体。方法:以人基因组DNA为模板,设计特定的引物进行PCR扩增获得3.892 kb长的hGR小基因片段,并将其连入pMD18-TSimple载体中,限制性内切酶酶切鉴定后,再亚克隆到PcDNA3载体中,获得hGR小基因真核表达质粒PcDNA3-hGR并测序验证。Lipofectamine法转染PcDNA3-hGR至HeLa细胞,RT-PCR检测hGR小基因剪接异构体hGRα and hGRβ mRNA的表达。结果:限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实克隆片段序列与GenBank目标序列一致;PcDNA3-hGR在HeLa细胞内成功表达剪接异构体hGRα和hGRβ。结论:hGR小基因真核表达载体构建成功,为进一步研究糖皮质激素受体基因外显子9的选择性剪接提供了细胞分子模型。

关 键 词:受体  糖皮质激素  基因  HeLa细胞  真核表达  
文章编号:1000-4718(2006)08-1660-05
收稿时间:2005-12-16
修稿时间:2005-12-162006-04-11

Construction of human glucocorticoid receptor minigene eukaryotic expression vector and its expression in HeLa cells
TANG Chen-hong,YU Zhi-qiang,LIU Rong-yu. Construction of human glucocorticoid receptor minigene eukaryotic expression vector and its expression in HeLa cells[J]. Chinese Journal of Pathophysiology, 2006, 22(8): 1660-1664. DOI: 1000-4718
Authors:TANG Chen-hong  YU Zhi-qiang  LIU Rong-yu
Abstract:
Keywords:Receptors, glucocorticoid   Genes   HeLa cells   Eukaryotic expression
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