17-β雌二醇对牙龈卟啉单胞菌作用下人牙周膜细胞表达白细胞介素6、8的影响

目的 观察17-β雌二醇(estradiol,E2)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg) W83作用下人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)白细胞介素(interleukin,IL)6和IL-8表达的影响.方法 原代培养hPDLC,传至第4代,分别以①10-10 mol/L E2(E21组);②10-7 mol/L E2(E22组);③感染复数为10∶1的Pg( Pg1组);③感染复数为100∶1的Pg(Pg2组);⑤感染复数为100∶1的Pg+ 10-10 mol/L E2(Pg2 +E21组);⑥感染复数为100∶1的Pg+10-7 mol/LE2(Pg2+ E22组)处理hPDLC 12和24h;以0.1％无水乙醇为对照组,酶联免疫吸附测定法榆测细胞IL-6和IL-8蛋白的表达水平,实时荧光定量反转录聚合酶链法检测24 h mRNA水平.采用单因素方差分析比较各组IL-6、IL-8蛋白和mRNA表达水平的组间差异,最小显著性差异事后比较检验进行组间差异的两两比较,采用独立样本t检验分析各组12和24 h IL-6、IL-8表达水平的差异,检验水准为双侧α=0.05.结果 Pg2组24h时IL-6蛋白表达水平(2482.88±26.53) ng/L]显著高于Pg1组(734.09±87.90)ng/L]、对照组(425.8±77.25) ng/L]和12 h时的Pg2组(1157.50±234.65) ng/L,P=0.000];Pg2组24 h时IL-8蛋白表达水平(4965.81±1072.55) ng/L]显著高于Pg1组(803.51 ±162.08) ng/L,P=0.007]、对照组(400.75±2.27) ng/L,p=0.005]和12h时的Pg2组(1431.12 ±82.78)ng/L,P=0.001].E2对hPDLC IL-6和IL-8的表达无显著调节作用.与感染复数100∶1的Pg单独作用相比,E2和Pg联合处理24 h显著促进了hPDLC IL-6的表达水平,而未影响IL-8的表达水平:Pg2 +E21组、Pg2+ E22组IL-6 mRNA相对于磷酸甘油醛脱氢酶的表达水平(分别为0.49±0.15、0.53±0.16)显著高于Pg2组(0.19±0.06) (P =0.021,P=0.036),两组IL-6蛋白水平分别为(5512.66±1022.07)、(6988.78±2279.13) ng/L]亦显著高于Pg2组(3138.46±183.72) ng/L](P=0.012,P=0.000).结论 PgW83促进hPDLC IL-6和IL-8的表达呈剂量和时间依赖性;无牙周致病菌感染时E2对hPDLC IL-6和IL-8的表达无显著调节作用;而在牙周感染Pg时E2可能与Pg协同直接促进hPDLC产生IL-6,从而可能促进了牙周炎症过程.