| 人胰高血糖素样肽-1突变体基因的构建和表达 |
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| 引用本文： | 刘莉,胡红琳,丁振兴,王佑民.人胰高血糖素样肽-1突变体基因的构建和表达[J].安徽医科大学学报,2006,41(6):632-635. |
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| 作者姓名： | 刘莉 胡红琳 丁振兴 王佑民 |
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| 作者单位： | 安徽医科大学内分泌代谢病研究所、第一附属医院内分泌科,合肥,230022 |
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| 基金项目： | 安徽省科技厅攻关项目（编号：06023064）;安徽医科大学校级基金（2005Kj58）、2006年度第一附属医院博士经费资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建人胰高血糖素样肽-1突变体（^2Gly-hGLP-1）基因，并表达GST一^2Gly-hGLP-1。方法用限制性内切酶双酶切载有hGLP cDNA的重组克隆质粒PMD18T simple和原核表达质粒pGEX-4T-1，将GLP-1定向插入原核表达载体pGEX-4T-1^＊中，筛选出阳性克隆。在获得重组hGLP-1基因工程菌的基础上，利用定向突变的技术改造其第2位丙氨酸为甘氨酸，经酶切克隆于pGEX-4T-1^＊中，构建pGEX-4T-1^＊／^2Gly-hGLP-1表达载体。转化大肠杆菌BL21并进行诱导表达。结果经测序分析，证明^2Gly-hGLP-1已经克隆到pGEX-4T-1^＊中。Western blot证实，该蛋白可被特异性hGLP-1识别。结论成功构建和表达了人胰高血糖素样肽-1突变体原核表达质粒。
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| 关 键 词： | 胰高血糖素／遗传学 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-1492（2006）06-0632-04 |
| 收稿时间： | 2006-09-30 |
| 修稿时间： | 2006-09-30 |
Construction of prokaryotic recombinant with complete human GLP-1 mutant cDNA |
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| Liu Li, Hu Honglin, Ding Zhenxing, et al.Construction of prokaryotic recombinant with complete human GLP-1 mutant cDNA[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2006,41(6):632-635. |
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| Authors: | Liu Li Hu Honglin Ding Zhenxing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | glucagon/genetics gene expression |
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