| 重组人IL-10融合蛋白的表达及其生物学活性测定 |
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| 引用本文： | 井申荣,邹全明,洪愉,毛旭虎. 重组人IL-10融合蛋白的表达及其生物学活性测定[J]. 免疫学杂志, 2006, 22(4): 399-401,405 |
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| 作者姓名： | 井申荣 邹全明 洪愉 毛旭虎 |
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| 作者单位： | 第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038;第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038;第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038;第三军医大学医学检验系临床微生物学及免疫学教研室,重庆市生物制药工程技术研究中心,重庆,400038 |
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| 摘 要： | 目的 在大肠杆菌中表达重组人白细胞介素10融合蛋白，获得有生物学活性的IL-10。方法 限制性内切酶Nco Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切目的基因IL-10，插入到同样双酶切的表达载体pET32a，构建重组载体IL-10／pET32a，测序正确后转化E.coli BL21（DE3），不同温度、低浓度IPTG诱导工程菌表达目的蛋白，SDS-PAGE和Westem blot检测目的蛋白的表达，ELISA和MC／9细胞增殖法分别测定IL-10的含量及生物学活性。结果 构建的表达重组载体IL-10／pET32a经酶切鉴定和序列测定表明完全正确，诱导工程菌可以表达可溶性的融合蛋白IL-10-Trx，同时也存在包含体融合蛋白，经Westem blot鉴定存在有目的蛋白IL-10，MC／9细胞增殖法测定可溶性的融合蛋白具有生物学活性。结论 成功表达了具有生物学活性的融合蛋白IL-10-Trx，有助于下游纯化和制备hIL-10基因工程药物。
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| 关 键 词： | 重组人白细胞介素10 融合蛋白 可溶性 生物学活性 |
| 文章编号： | 1000-8861（2006）04-0399-04 |
| 收稿时间： | 2005-10-20 |
| 修稿时间： | 2005-10-202006-02-27 |
Expression of fusion rhIL-10 in E. coli and its bioactivity |
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| JING Shen-rong,ZOU Quan-ming,HONG Yu,MAO Xu-hu. Expression of fusion rhIL-10 in E. coli and its bioactivity[J]. Immunological Journal, 2006, 22(4): 399-401,405 |
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| Authors: | JING Shen-rong ZOU Quan-ming HONG Yu MAO Xu-hu |
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| Affiliation: | Department of Clinical Microbiology and Immunology, College of Medical Laboratory, Third Military Medical University, Chongqing 400038, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Recombinant human IL-10 Fusion protein Solubility Bioactivity |
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