| 肝癌中蛋白激酶CK2α亚基的克隆及其功能初步研究 |
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| 引用本文： | 陆东东,张锡然. 肝癌中蛋白激酶CK2α亚基的克隆及其功能初步研究[J]. 现代肿瘤医学, 2003, 11(2): 99-101 |
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| 作者姓名： | 陆东东 张锡然 |
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| 作者单位： | 1. 南京师范大学生命科学院,南京,210097;江苏省启东肝癌研究所,江苏启东,226200
2. 江苏省启东肝癌研究所,江苏启东,226200 |
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| 摘 要： | 目的 克隆肝癌中CK2α基因，并研究其功能。方法 通过逆转录PCR从肝癌组织中获得CK2α亚基基因编码区cDNA。将NdeI／BamHI双酶切PCR产物连接到同样双酶切并经牛小肠碱性磷酸酶去磷酸化的表达载体pT7—7进行定向克隆。转化感受态大肠杆菌DH5获得转化子，琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化子，将阳性克隆进行单和双酶切分析鉴定。随机挑选4个阳性克隆进行DNA测序，将序列完全正确的重组质粒转化表达菌BL21(DE3)，挑单克隆小量培养，IPTG诱导表达，Western blot鉴定。结果 转化子的阳性筛选率为l00％，限制性酶分析结果表明，插入片段和重组质粒的大小与理论推测值相符。DNA正反向测序结果表明：从4个阳性克隆中筛选到1个PCR过程不产生突变的重组质粒，并将其质粒命名为pTMCKA。重组质粒转化表达菌经TPTG诱导后出现一个分子量42Kdα蛋白过度表达，Westen blot结果证明过度表达产物能与抗人CK2α亚基抗体发生特异性免疫反应。结论 蛋白激酶CK2α亚基在肝癌中表达，并产生一定的功能。
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| 关 键 词： | 肝癌 蛋白激酶 CK2α亚基 基因克隆 基因表达 原癌基因 |
| 文章编号： | 1008-7001(2003)02-0099-03 |
The study of expression and function of CK2α subunit in hepatocellular carcinoma |
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| LU Dong-dong. The study of expression and function of CK2α subunit in hepatocellular carcinoma[J]. Journal of Modern Oncology, 2003, 11(2): 99-101 |
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| Authors: | LU Dong-dong |
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