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人乳腺癌MDR1基因稳定沉默细胞的筛选及其生物学特性
引用本文:王明玉,宋丽华,宋现让,魏玲,孙桂云,王兴武,谭学芬. 人乳腺癌MDR1基因稳定沉默细胞的筛选及其生物学特性[J]. 基础医学与临床, 2008, 28(2): 138-143
作者姓名:王明玉  宋丽华  宋现让  魏玲  孙桂云  王兴武  谭学芬
作者单位:山东省肿瘤医院,内科,山东济南,250117;山东省肿瘤医院,基础研究中心,山东济南,250117
摘    要:目的筛选MDR1沉默的人乳腺癌细胞并比较其生物学特性。方法采用BLOCK-iT Lentiviral RNAi Expres-sion System生产表达MDR1基因shRNA的慢病毒载体,转导敏感人乳腺癌细胞MCF-7和耐阿霉素人乳腺癌细胞MCF-7/ADM,杀稻瘟菌素(blasticidin)筛选获得MDR1稳定沉默细胞MCF-7/RNAi和MCF-7/ADM/RNAi。定量RT-PCR检测MDR1mRNA表达,流式细胞术检测P-GP蛋白表达和功能,MTT法检测药物敏感性。结果经10 mg/L blasticidin筛选12 d获得MCF-7/RNAi和MCF-7/ADM/RNAi细胞。MCF-7、MCF-7/RNAi、MCF-7/ADM和MCF-7/ADM/RNAi细胞的MDR1mRNA相对表达水平分别为1、0.13、17.14和2.01;P-GP表达分别为(1.5±0.3)%、(1.2±0.2)%、(89.4±3.6)%和(16.3±1.9)%;细胞内Rh123的潴留分别为(92.4±3.1)%、(90.6±4.0)%、(13.6±1.6)%、(72.4±2.8)%;IC50值分别为0.90、0.92、19.61和4.04 mg/L。结论应用慢病毒载体稳定沉默MDR1基因可有效逆转人乳腺癌细胞耐药性。

关 键 词:乳腺癌  多药耐药基因1  RNA干扰  慢病毒
文章编号:1001-6325(2008)02-0138-06
收稿时间:2007-03-14
修稿时间:2007-07-16

Screening of stabilizing silencing MDR1 gene cell line of human breast cancer and its biological property
WANG Ming-yu,SONG Li-hua,SONG Xian-rang,WEI Ling,SUN Gui-yun,WANG Xing-wu,TAN Xue-fen. Screening of stabilizing silencing MDR1 gene cell line of human breast cancer and its biological property[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2008, 28(2): 138-143
Authors:WANG Ming-yu  SONG Li-hua  SONG Xian-rang  WEI Ling  SUN Gui-yun  WANG Xing-wu  TAN Xue-fen
Abstract:
Keywords:breast cancer  multidrug resistance gene 1(MDR1)  RNA interference  lentivirus
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