补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征的作用机制：基于网络药理学和分子对接方法

目的 探究补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征的主要活性成分、靶点、通路等药理学作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选出补肾化痰方中药物的主要活性成分，使用 PubChem和Swiss Target Prediction预测活性成分相关作用靶点；应用GeneCards、OMIM筛选治疗疾病多囊卵巢综合征的作用靶点；将药物靶点与疾病靶点通过Uniprot校正后，取交集靶点；结合STRING构建蛋白-蛋白互作（PPI）网络，并利用Cytoscape3.7.2中的CytoNCA插件对交集靶点进行PPI分析，筛选出核心靶点；采用DAVID数据库进行基因功能GO富集分析和KEGG通路富集分析；利用AutoDock对补肾化痰方中的核心活性成分和核心靶点进行分子对接验证。以动物实验进行验证，24只SPF级雌性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为3 组：对照组［n=8，1 mg/（kg?d）生理盐水灌服35 d］，模型组［n=8，1 mg/（kg?d）来曲唑溶于1%羧甲基纤维素（CMC）中，连续灌服35 d，并予高脂饲料喂养］，治疗组［n=8，造模后予以1 mg/（kg?d）补肾化痰方颗粒剂溶于5%生理盐水中，连续灌服35 d］。小鼠末次给药后，取卵巢组织于-80 ℃保存，Western blot法检测小鼠卵巢组织中核心靶点和核心通路的表达。结果 补肾化痰方中14味中药共筛选出125个潜在活性成分，990个药物靶点，4759个PCOS靶点，药物与PCOS交集靶点434个；核心活性成分主要为β-谷甾醇、山奈酚、槲皮素等，核心靶点主要为PIK3CA、PIK3R1、APP、AKT1、MAPK1等；GO功能富集主要包括药物反应、凋亡过程的负调控、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控等；KEGG富集通路主要包括癌症通路、HIF-1信号通路、Rap1信号通路、PI3K-Akt信号通路等；分子对接结果显示核心活性成分β-谷甾醇、山奈酚、槲皮素与核心靶点PIK3CA、PIK3R1、APP、AKT1、MAPK1均有强烈的结合能力；动物实验结果表明，补肾化痰方能明显改善多囊卵巢综合征相关症状，并下调PI3K，AKT蛋白表达，上调MAPK1蛋白表达，验证了网络药理学的部分预测结果。结论 揭示了补肾化痰方多成分、多靶点、多途径的作用特点，预测并通过实验初步验证了补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征的可能作用机制。

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