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| Smad4/DPC4基因小发夹RNA质粒表达载体的构建和鉴定 | |
| 引用本文： | 季国忠,张发明,黄曙,缪林,刘政,喻容彬,王学浩. Smad4/DPC4基因小发夹RNA质粒表达载体的构建和鉴定[J]. 医学研究生学报, 2006, 19(11): 973-977 |
| 作者姓名： | 季国忠 张发明 黄曙 缪林 刘政 喻容彬 王学浩 |
| 作者单位： | 1. 南京医科大学第二附属医院消化科,江苏,南京,210011 2. 第四军医大学西京医院解放军消化研究所,陕西,西安,710033 3. 南京医科大学公共卫生学院,江苏,南京,210029 4. 南京医科大学第一附属医院肝胆外科,江苏,南京,210029 |
| 基金项目： | 江苏省自然科学基金;南京医科大学校科研和教改项目 |
| 摘 要： | 目的：构建Smad4基因小发夹RNA（shRNA）表达载体。方法：设计、合成3对编码Smad4基因shRNA的寡核苷酸序列，并分别将其克隆人pGCsi—H1／Neo／GFP质粒，酶切、测序鉴定，脂质体法转染293细胞。实时荧光定量PCR检测RNA干扰（RNAi）的抑制效果。结果：在经Hindm和BamHⅠ双酶切分别鉴定三种重组载体后，DNA测序证实小干扰RNA（siRNA）序列正确，并被准确克隆人载体。实时荧光定量PCR检测结果表明三种重组载体psiSmad4—1、psiSmad4—2和psiSmad4—3载体，分别对293细胞中Smad4基因mRNA表达的特异性抑制率为39．00％、8．80％和73．80％。结论：成功构建Smad4pGCsi—H1／Neo／GFP／shRNA质粒，为后期研究Smad4基因在肿瘤细胞中的作用机制和基因治疗打下基础。 |
| 关 键 词： | RNA干扰 小发夹RNA 293细胞 肿瘤 |
| 文章编号： | 1008-8199(2006)11-0973-03 |
| 修稿时间： | 2006-06-05 |
Construction and identification of the small hairpin RNA expression vector of Smad4/DPC4 gene |
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| JI Guo-zhong,ZHANG Fa-ming,HUANG Shu,MIAO Lin,LIU Zheng,YU Rong-bin,WANG Xue-hao. Construction and identification of the small hairpin RNA expression vector of Smad4/DPC4 gene[J]. Bulletin of Medical Postgraduate, 2006, 19(11): 973-977 | |
| Authors: | JI Guo-zhong ZHANG Fa-ming HUANG Shu MIAO Lin LIU Zheng YU Rong-bin WANG Xue-hao |
| Abstract: | |
| Keywords: | Smad4 |
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