| 泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 冯大明,王仁,孙文清,郭芳,屈顺林,杨向东.泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备[J].中国动脉硬化杂志,2005,13(3):263-266. |
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| 作者姓名： | 冯大明 王仁 孙文清 郭芳 屈顺林 杨向东 |
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| 作者单位： | 1. 南华大学医学院,病理生理学教研室,湖南省,衡阳市,421001
2. 南华大学医学院,心血管病研究所,湖南省,衡阳市,421001 |
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| 基金项目： | 中家自然科学基金（30200103）和湖南省自然科学基金（02JJY4011）资助 |
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| 摘 要： | 目的探讨制备泡沫细胞相关基因4多克隆抗体的方法。方法将从人胎肝文库经聚合酶链反应扩增获得的泡沫细胞相关基因4基因全长cDNA序列，通过生物信息学分析，预测泡沫细胞相关基因4编码氨基酸序列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域．并进行了多序列比对，并根据蛋白质的亲疏水性、二级结构、偶联难度及实验难度等，确定泡沫细胞相关基因4抗原13肽PKLVKEEVFWRNY，采用固相多肽合成法合成该抗原片段．偶联后经过基础免疫，6次加强免疫，经追踪检测，于第四次免疫后10～14天颈动脉放血，分离血清，冷冻抽干，-20℃保存而制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体。结果用固相多肽合成法成功制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体，该抗体经间接酶联免疫吸附测定法检测其效价为1：16000，Western blot检测可见40kDa处有目的带，用免疫组织化学方法从HepG2细胞中检测到泡沫细胞相关基因4蛋白表达，证实该抗体具有较好的反应性和特异性。结论固相多肽合成法省时、省力、制备的抗体效价高；泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备，为进一步研究泡沫细胞相关基因4蛋白在动脉粥样硬化中的功能作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 病理学与病理生理学 泡沫细胞相关基因4蛋白 多肽合成 多克隆抗体 制备 |
| 文章编号： | 1007-3949（2005）13-03-0263-04 |
| 收稿时间： | 2004-07-26 |
| 修稿时间： | 2005-05-16 |
The Preparation of Foam Cell Related Gene 4 Rabbit Anti-Human Polyclonal Antibody |
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| FENG Da-Ming,WANG Ren,SUN Wen-Qing,GUO Fang,QU Shun-Lin,and YANG Xiang-Dong.The Preparation of Foam Cell Related Gene 4 Rabbit Anti-Human Polyclonal Antibody[J].Chinese Journal of Arteriosclerosis,2005,13(3):263-266. |
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| Authors: | FENG Da-Ming WANG Ren SUN Wen-Qing GUO Fang QU Shun-Lin and YANG Xiang-Dong |
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| Institution: | 1. Department of Pathophysiology,2.Institue of Cardiovascular Disease, Nanhua University, Hengyang 421001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Foam Cell Related Gene 4 Protein Pepfide Synthesis Polyclonal Antibody Preparation |
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