摘 要: | 目的 探讨归芍方对斑马鱼眼部细胞凋亡模型的影响及其不同提取方法与药理作用间关系,进一步研究归芍方抗眼部细胞凋亡作用相关机制。方法 将受精后30 h斑马鱼分为正常对照组、归芍方药材水提取物(ME)组、水提醇沉提取物(MEA)组和提取物配方(PS)组,于给药后24和48 h观察斑马鱼存活率。吖啶橙染色观察药物对斑马鱼眼部细胞凋亡的影响。将受精后30 h斑马鱼分为正常对照组、模型对照组、人参皂苷Rg1组和低中高浓度ME、MEA、PS组。模型对照组给予10μmol·L-1邻苯二甲酸二丁酯(DBP),人参皂苷Rg1组及归芍方各给药组于造模同时分别给予1μmol·L-1人参皂苷Rg1和10,50,100μg·mL-1ME、MEA及PS,培养18 h后观察眼部细胞凋亡数目。免疫印迹(Western blotting)法检测凋亡相关蛋白Bcl-2表达,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测线粒体mtDNA拷贝数变化。结果 归芍方各提取物100μg·mL-1及其以下浓度对斑马鱼存活率无显著影响;1μmol·L
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