改良二步酶消化法行免RPE分离的研究

目的 研究RPE在改良二步酶消化法分离后的离体状态下生物学特性。方法 实验动物为有色家兔，应用显微手术技术完成必要的手术过程，加入酶Ⅰ与酶Ⅱ分离获取细胞，并培养传代计数鉴定。结果 采用改良二步酶消化法获取的原代细胞，呈球形浮于培养液中，细胞内黑色素颗粒多，经传代后细胞生长旺盛染色鉴定见细胞胞浆粉红色，胞核蓝色，可见许多双核细胞。免疫组化法染色鉴定，可见细胞着色率100％，细胞浆被染成深浅不同的黄色。结论 我们采用改良二步酶消化法获取RPE细胞显示出一定优点，细胞损伤小，获取细胞数量多，纯度高，实验时间短，成本相对低廉。