| 紫芝倍半萜合酶GsSTPS2可溶性表达条件的探索 |
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| 引用本文： | 卫倩鹤,王齐,曹瑞,王丽芝,王海英. 紫芝倍半萜合酶GsSTPS2可溶性表达条件的探索[J]. 天津中医药大学学报, 2022, 41(6): 780-788 |
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| 作者姓名： | 卫倩鹤 王齐 曹瑞 王丽芝 王海英 |
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| 作者单位： | 天津中医药大学, 天津 301617 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金青年项目(201810063007)。 |
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| 摘 要： | [目的] 探索可溶性较差蛋白紫芝倍半萜合酶GsSTPS2的表达方法。[方法] 更换不同的表达载体和表达菌株，通过对不同菌体密度、温度、时间、IPTG浓度的筛选优化GsSTPS2的诱导表达条件，在此基础上采用顶空固相微萃取法（HS-SPME）与气质联用技术（GC-MS）相结合分析重组大肠杆菌细胞培养液中的挥发性成分，鉴定GsSTPS2在大肠杆菌体内的催化活性。[结果] 在初始菌液OD600为0.8，诱导温度为18℃，诱导时间为12h，IPTG终浓度为1mmol/L的培养条件下重组蛋白pET32a-GsSTPS2在Rosetta（DE3）中的可溶性表达量最高，达到28.07%。GsSTPS2可催化生成倍半萜碳氢化合物δ-杜松烯、杜松-3，5-二烯、β-杜松烯和顺-衣兰油-4（15），5-二烯及倍半萜含氧衍生物异香叶醇，荜澄茄油烯醇和τ-依兰油醇，其中异香叶醇作为GsSTPS2的主产物之一，具有杀白蚁、抗蠕虫和植物生长调节作用，有良好的应用价值和前景。[结论] 本研究为可溶性较差或者易形成包涵体蛋白的表达提供了参考，为通过合成生物学方法生产异香叶醇奠定了基础。
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| 关 键 词： | 紫芝 倍半萜合酶 功能验证 HS-SPME-GC-MS分析 |
| 收稿时间： | 2022-09-01 |
Study on soluble expression conditions of sesquiterpene synthase GsSTPS2 from Ganoderma sinense |
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| WEI Qianhe,WANG Qi,CAO Rui,WANG Lizhi,WANG Haiying. Study on soluble expression conditions of sesquiterpene synthase GsSTPS2 from Ganoderma sinense[J]. Journal of Tianjin University of Traditonal Chinese Medicine, 2022, 41(6): 780-788 |
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| Authors: | WEI Qianhe WANG Qi CAO Rui WANG Lizhi WANG Haiying |
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| Affiliation: | Tianjin University of Traditional Chinese Medicine, Tianjin 301617, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ganoderma sinense sesquiterpene synthase characterization HS-SPME-GC-MS |
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