| 药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸的酶法合成 |
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| 引用本文： | 赵春晖,徐 洁,曹 瀛,冯 斌.药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸的酶法合成[J].大连医科大学学报,2013,35(1):18-22. |
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| 作者姓名： | 赵春晖 徐 洁 曹 瀛 冯 斌 |
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| 作者单位： | 1. 辽宁师范大学生命科学学院,辽宁大连,116081
2. 大连医科大学生物技术系,辽宁大连,116044 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(21102067,81071248) |
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| 摘 要： | 目的 利用在大肠杆菌中高效重组表达的O-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶A(OASS-A)合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸,并对合成产物进行纯度及结构鉴定.方法 通过PCR扩增目的基因Cys K,并连接到pET-22b(+)载体上构建原核表达质粒,重组体转到感受态大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达,重组蛋白采用Ni2-树脂柱亲和层析纯化,利用SDS-PAGE鉴定表达纯化蛋白,通过HPLC对合成产物纯度进行检测,应用1H NMR技术对化合物进行结构鉴定.结果 成功构建了OASS-A原核表达载体,在IPTG诱导下获得了高效表达.重组酶高效合成非蛋白质氨基酸S-苯基-L-半胱氨酸.合成的化合物以晶体形式析出,采用HPLC和1HNMR技术对其结构进行了鉴定,合成产物的纯度为100％.结论 利用大肠杆菌中重组表达的OASS-A能够高效合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸.
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| 关 键 词： | S-苯基-L-半胱氨酸 酶法合成 O-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶 非蛋白质氨基酸 |
| 收稿时间： | 2012/10/8 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2012/12/4 0:00:00 |
Enzymatic synthesis of pharmaceutical intermediates S-phenyl-L-cysteine |
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| ZHAO Chun-hui
,
XU Jie
,
CAO Ying
,
FENG Bin.Enzymatic synthesis of pharmaceutical intermediates S-phenyl-L-cysteine[J].Journal of Dalian Medical University,2013,35(1):18-22. |
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| Authors: | ZHAO Chun-hui XU Jie CAO Ying FENG Bin |
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| Institution: | 1.College of Life Science,Liaoning Normal University,Dalian 116081,China;2.Department of Biotechnology,Dalian Medical University,Dalian 116044,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | S-phenyl-L-cysteine enzymatic synthesis O-acetylserine sulfhydrylase unnatural amino acids |
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