| 小鼠甲胎蛋白基因顺式调控元件的选择性克隆重组及功能研究 |
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| 引用本文： | 司少艳,隋延仿,李增山,曹云新,黄亚渝,张秀敏. 小鼠甲胎蛋白基因顺式调控元件的选择性克隆重组及功能研究[J]. 现代肿瘤医学, 2006, 14(3): 257-261 |
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| 作者姓名： | 司少艳 隋延仿 李增山 曹云新 黄亚渝 张秀敏 |
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| 作者单位： | 1. 第四军医大学病理学教研室,陕西,西安,710032
2. 第四军医大学免疫学教研室,陕西,西安,710032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30271464)，全军医药卫生科研基金(01Z084)重点资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建并选择肝癌特异性甲胎蛋白(AFP)基因启动元件。方法采用PCR方法从小鼠肝脏克隆AFP基因增强子I、抑制子和启动子,经过不同组合构建了两个真核表达载体:pEGFP-1-EP(含调控序列I:增强子I 启动子)和pEGFP-1-ERP(含调控序列II:增强子I 抑制子 启动子)。通过瞬时转染,采用荧光显微镜观察和流式细胞仪检测所构建调控序列分别在小鼠肝癌细胞株Hepa1-6、黑色素瘤细胞株B16和成纤维细胞株NIH3T3的活性。结果所得AFP基因增强子I、抑制子和启动子序列与Genebank中公布的相关序列一致;荧光显微镜下:pEGFP-1-EP和pEGFP-1-ERP转染Hepa1-6细胞呈强阳性反应,pEGFP-1(空载体)转染Hepa1-6和三种质粒转染的B16、NIH3T3细胞均呈阴性反应;流式细胞仪检测结果显示:pEGFP-1-EP转染Hepa1-6阳性细胞率和平均荧光强度高于pEGFP-1-ERP转染Hepa1-6细胞,两者阳性细胞率和平均荧光强度均高于pEGFP-1转染Hepa1-6细胞;pEGFP-1转染Hepa1-6和三种质粒转染B16、NIH3T3阳性细胞率和平均荧光强度均较低。结论我们所构建小鼠AFP基因调控序列I和调控序列II的启动活性均具有肝癌特异性,且前者高于后者,并选择调控序列I在下一步肝癌特异性基因治疗中使用。
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| 关 键 词： | 甲胎蛋白 顺式调控元件 靶向性 肝癌 |
| 文章编号： | 1672-4992-（2006）03-0257-05 |
| 收稿时间： | 2005-07-13 |
| 修稿时间： | 2005-07-13 |
Selective cloning and recombination of the murine alpha-fetoprotein cis-acting elements and studies of their functions |
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| SI Shao -yan, SUI Yan - fang, LI Zeng - shan,et al. Selective cloning and recombination of the murine alpha-fetoprotein cis-acting elements and studies of their functions[J]. Journal of Modern Oncology, 2006, 14(3): 257-261 |
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| Authors: | SI Shao -yan SUI Yan - fang LI Zeng - shan et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | alpha-fetoprotein cis-acting elements targeting hepatoma |
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