| 人乳头瘤病毒11型DNA中CpG基序甲基化状态分析及生物活性的研究 |
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| 引用本文： | 艾军华,吕凤林,左国伟,金丹,李元朝,胡承香. 人乳头瘤病毒11型DNA中CpG基序甲基化状态分析及生物活性的研究[J]. 免疫学杂志, 2005, 21(1): 29-32,36 |
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| 作者姓名： | 艾军华 吕凤林 左国伟 金丹 李元朝 胡承香 |
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| 作者单位： | 第三军医大学大坪医院野战外科研究所第一研究室,创伤烧伤复合伤国家重点实验室,重庆,400042 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 4 0 0 386)，重庆市科技攻关课题(0 1 6647)资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 对人乳头瘤病毒 11型全核苷酸序列的CpG基序 (CpGmotifs)进行分析 ,为阐明尖锐湿疣的发病机制和提高DNA疫苗的效能奠定理论基础。方法 对从pBR32 2 HPV11重组质粒上酶切下来的HPV11全长DNA进行计算机分析 ,包括分类、计数和定位 ;并用限制性内切酶PCR法分析HPV11DNA中CpG基序的甲基化状态 ,即分别用甲基化敏感的限制性内切酶AccⅡ、HaeⅡ和HpaⅡ对HPV11DNA进行酶切消化 ,再以HpaⅡ切割位点侧翼序列为引物 ,以HpaⅡ酶切产物为模板 ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV11DNA片断 ,并用HPV11DNA刺激表达有pCIneo TLR9的HEK2 93细胞 ,ELISA法检测TNF al pha、IFN alpha和IL 12的分泌。结果 CpG的“C”的侧翼为两个嘌呤 ,“G”的侧翼为两个嘧啶 ,在HPV11中共 14个。HPV11全基因组被AccⅡ切成 2个片断、被HaeⅡ切成 3个片断、被HpaⅡ切成 5个片断 ,而且以HpaⅡ酶切产物为模板进行PCR扩增 ,未能得到相应的片断。HPV 11DNA刺激有人TLR9表达的HEK2 93细胞后能检测到TNF alpha、IFN alpha和IL 12的分泌。结论 乳头瘤病毒 11型DNA中含有GACGTT等非甲基化的CpG基序 ,而且具有免疫原性
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| 关 键 词： | 人乳头瘤病毒11型 CpG基序 核苷酸序列分析 限制性内切酶PCR法 |
| 文章编号： | 1000-8861(2005)01-0029-04 |
Methylation and biological activity of CpG motifs in human papillomavirus 11 DNA |
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| AI Jun-hua,LV Feng-lin,ZUO Guo-wei,JIN Dan,LI Yuan-chao,HU Cheng-xiang. Methylation and biological activity of CpG motifs in human papillomavirus 11 DNA[J]. Immunological Journal, 2005, 21(1): 29-32,36 |
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| Authors: | AI Jun-hua LV Feng-lin ZUO Guo-wei JIN Dan LI Yuan-chao HU Cheng-xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Human papillomavirus type 11 CpG motifs Nucleotide sequence analysis Restriction endonuclease polymerase chain reaction |
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