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运用抑制性消减杂交技术构建糖尿病肾阳虚证DNA消减文库
引用本文:崔丽娟,赵晓山,罗仁,董晓蕾,周琳,孙晓敏. 运用抑制性消减杂交技术构建糖尿病肾阳虚证DNA消减文库[J]. 中国中医基础医学杂志, 2006, 12(3): 192-194
作者姓名:崔丽娟  赵晓山  罗仁  董晓蕾  周琳  孙晓敏
作者单位:1. 南方医科大学南方医院,中医科,广东,广州,510515
2. 广东省中医院,内二科,广东,广州,510105
3. 南京军区总医院,中医科,江苏,南京,210002
4. 南方医科大学南方医院,内分泌科,广东,广州,510515
基金项目:中国科学院资助项目;国家中医药管理局科研项目;广东省科技计划
摘    要:目的:运用抑制性消减杂交技术(suppression subtractive hybridization,SSH)构建糖尿病(Diabetic mellitus,DM)肾阳虚证DNA消减文库。方法:选择汉族中医辨证为肾阳虚证的DM患者以及正常人做对照组,进行正向和反向消减杂交。用RsaⅠ酶切用硅胶法抽提基因组DNA成大小不等的片段,分别连接两种不同的接头,进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将PCR产物与U/A载体连接,经蓝白斑筛选及菌液PCR筛选出阳性重组质粒,构建DM肾阳虚证DNA消减文库。结果:用SSH方法筛选出DM肾阳虚证的差异DNA片段,经克隆及PCR筛选出阳性重组质粒,从而成功地构建了DM肾阳虚证的DNA消减文库。结论:SSH技术能够快速有效地分离差异DNA片段以构建DM肾阳虚证DNA消减文库,为进一步筛选和克隆DM肾阳虚证相关基因奠定了基础。

关 键 词:糖尿病  肾阳虚证  抑制性消减杂交  基因组消减文库
文章编号:1006-3250(2006)03-0192-03
收稿时间:2005-04-20
修稿时间:2005-04-20

Suppression Subtractive Hybridization in Construction of DNA Subtractive Library of Kidney Yang Deficiency of Diabetic Mellitus
CUI Li-juan,ZHAO Xiao-shan,LUO Ren,DONG Xiao-lei,ZHOU Lin,SUN Xiao-min. Suppression Subtractive Hybridization in Construction of DNA Subtractive Library of Kidney Yang Deficiency of Diabetic Mellitus[J]. Chinese Journal of Basic Medicine In Traditional Chinese Medicine, 2006, 12(3): 192-194
Authors:CUI Li-juan  ZHAO Xiao-shan  LUO Ren  DONG Xiao-lei  ZHOU Lin  SUN Xiao-min
Affiliation:1. Department of Traditional Chinese Medicine, Nan Fang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China ; 2. Hospital of TCM of Guangdong Province, Guangzhou University of TCM, Guangzhou 510105, China;3. Department of Traditional Chinese.Medicine, Nanjing General Hospital of Nanjing Command, Nanjing 210002, China ; 4. Department of Traditional Department of Endocrinology, Nan Fang Hospital, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China
Abstract:
Keywords:diabetic mellitus  kidney yang deficiency syndrome  suppression subtractive hybridization  DNA subtractive library
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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